Mine otse sisu juurde
Kude
Perifeerne veri
Haigus
B-rakkude prolimfotsütaarne leukeemia
Metastaaside asukoht
Perifeerne veri (leukeemiline)
Sünonüümid
JVM3

Dokumendid

JVM-3

Cell line · Toote number 305266

€0.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

JVM-3 on inimese B-rakkude prolimfotsütaarse leukeemia (B-PLL) rakuliin, mis on loodud 73-aastase kaukaasia päritolu meespatsiendi perifeersest verest. See liin kasvab suspensioonis lümfoblastoidsete rakkudena kas üksikult või hõredates kimpudes ning on laialdaselt kasutatav mudel B-PLL-i jaoks, mis on haruldane ja agressiivne küpsete B-rakkude leukeemia. JVM-3-s esinevad TP53-mutatsioonid (p.Pro1435Leu heterosügootne ja p.Lys601Asn heterosügootne), mis inaktiveerivad p53-i kasvajavastase funktsiooni ja on seotud resistentsusega kemoteraapia suhtes B-rakkude pahaloomuliste kasvajate korral. Liini kasvatatakse 90% RPMI 1640 + 10% kuumutamisega inaktiveeritud FBS-i keskkonnas.

JVM-3 sobib kasutamiseks B-PLL-i uurimisel, sealhulgas küpsete B-rakkude leukeemia bioloogia uuringutes, TP53-mutatsioonidega seotud ravimresistentsuse uurimisel, BCR-signaalitee analüüsis, sihtterapiate (BTK-inhibiitorid, venetoklaks, CD20-vastased antikehad) ning B-rakkude pahaloomuliste kasvajate farmakoloogilises ravimite sõelumises. Seda kasutatakse ka B-rakkude leukeemia alatüüpide võrdlevates uuringutes ning ksenotransplantaadi mudelina immuunpuudulikkusega peremeesorganismides.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
B-rakkude prolimfotsütaarne leukeemia
Metastaaside asukoht
Perifeerne veri (leukeemiline)
Rakendused
B-rakkude prolimfotsütaarse leukeemia uurimine; küpsete B-rakkude leukeemia bioloogia; TP53-mutatsiooniga seotud ravimresistentsus; BTK-inhibiitorite hindamine; venetoklaksi suhtes tundlikkus; CD20-vastaste antikehade testimine; B-rakkude leukeemia ravimite sõelumine
Sünonüümid
  • JVM3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
suspensioonis üksikult või kimpudena kasvavad lümfoblastoidsed rakud;
Rakutüüp
B lümfoblast
Kahekordistumisaeg
~30 tundi

04Tunnused

Viide
JVM-3 (Cytioni katalooginumber 305266)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Pro1435Leu, heterosügootne; mutatsioon: p.Lys601Asn, heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Ei ole vajalik (suspensioonikultuur)
Kultuuri edasikasvatamine
Lahjendage kultuuri iga 2–3 päeva tagant värske, eelsoojendatud täisväärtusliku kasvukeskkonnaga kontsentratsioonini 2–5 × 10⁵ rakku/ml. Loendage eluvõimelised rakud enne ülekandmist. Vajaduse korral võib kasvukeskkonna vahetamiseks kasutada tsentrifuugimist (300×g, 5 min).
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
3–5 × 10⁵ rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 2 kuni 3 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
73 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia