Przejdź do treści
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
B-komórkowa białaczka prolimfocytowa
Miejsce przerzutów
Krew obwodowa (z białaczką)
Synonimy
JVM3

Dokumenty

JVM-3

Cell line · Numer produktu 305266

€0.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

JVM-3 to ludzka linia komórkowa białaczki prolimfocytowej z komórek B (B-PLL), wyhodowana z krwi obwodowej 73-letniego pacjenta rasy kaukaskiej. Linia ta rośnie w zawiesinie jako komórki limfoblastoidalne, pojedynczo lub w luźnych skupiskach, i stanowi szeroko stosowany model B-PLL, rzadkiej i agresywnej białaczki z dojrzałych komórek B. JVM-3 zawiera mutacje genu TP53 (heterozygotyczną p.Pro1435Leu oraz heterozygotyczną p.Lys601Asn), które dezaktywują funkcję supresorową p53 i są związane z opornością na chemioterapię w nowotworach złośliwych komórek B. Linia ta jest hodowana w pożywce składającej się z 90% RPMI 1640 i 10% FBS inaktywowanego termicznie.

Linia JVM-3 ma zastosowanie w badaniach nad B-PLL, w tym w badaniach nad biologią białaczki z dojrzałych komórek B, opornością na leki związaną z mutacjami TP53, analizą szlaku sygnałowego BCR, oceną terapii celowanych (inhibitory BTK, wenetoklaks, przeciwciała skierowane przeciwko CD20) oraz farmakologicznego przesiewania leków w przypadku nowotworów z komórek B. Wykorzystuje się ją również w badaniach porównawczych podtypów białaczki z komórek B oraz jako model przeszczepu heterogenicznego u biorców z obniżoną odpornością.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
B-komórkowa białaczka prolimfocytowa
Miejsce przerzutów
Krew obwodowa (z białaczką)
Zastosowania
Badania nad białaczką prolimfocytową komórek B; biologia białaczki z dojrzałych komórek B; oporność na leki związana z mutacją genu TP53; ocena inhibitorów BTK; wrażliwość na wenetoklaks; badania nad przeciwciałami skierowanymi przeciwko CD20; przesiewowe badania leków stosowanych w białaczce komórek B
Synonimy
  • JVM3

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
komórki limfoblastoidalne rosnące pojedynczo lub w skupiskach w zawiesinie;
Typ komórki
Limfoblast B
Czas podwojenia
~30 godzin

04Identyfikatory

Źródło
JVM-3 (numer katalogowy Cytion 305266)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: p.Pro1435Leu, heterozygotyczna; Mutacja: p.Lys601Asn, heterozygotyczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Nie jest wymagane (hodowla w zawiesinie)
Hodowla komórek w subkulturze
Co 2–3 dni należy rozcieńczać hodowlę do stężenia 2–5 × 10⁵ komórek/ml, dodając świeżą, wstępnie podgrzaną pożywkę kompletną. Przed przesadzeniem należy policzyć żywe komórki. W razie potrzeby do wymiany pożywki można zastosować wirowanie (300×g, 5 min).
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
od 3 do 5 × 10⁵ komórek/ml
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
73 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski