Prejsť na obsah
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Prolymfocytová leukémia B-buniek
Miesto metastáz
Periférna krv (leukemická)
Synonymá
JVM3

Dokumenty

JVM-3

Cell line · Číslo výrobku 305266

€0.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

JVM-3 je bunková línia ľudskej prolymfocytovej leukémie B-buniek (B-PLL), ktorá bola izolovaná z periférnej krvi 73-ročného pacienta kaukazského pôvodu. Táto línia rastie v suspenzii ako lymfoblastoidné bunky buď samostatne, alebo vo voľných zhlukoch a je široko používaným modelom pre B-PLL, zriedkavú a agresívnu leukémiu zrelých B-buniek. JVM-3 obsahuje mutácie génu TP53 (heterozygotná mutácia p.Pro1435Leu a heterozygotná mutácia p.Lys601Asn), ktoré inaktivujú tumor-supresorovú funkciu p53 a sú spojené s rezistenciou voči chemoterapii pri malignitách B-buniek. Táto bunka sa kultivuje v 90 % RPMI 1640 + 10 % tepelne inaktivovaného FBS.

JVM-3 je vhodná na výskum B-PLL, vrátane štúdií biológie leukémie zrelých B-buniek, rezistencie voči liekom súvisiacej s mutáciami génu TP53, analýzy signálnej dráhy BCR, hodnotenia cielených terapií (inhibítory BTK, venetoklax, protilátky namierené proti CD20) a farmakologického skríningu liekov pre malígne ochorenia B-buniek. Používa sa tiež v komparatívnych štúdiách podtypov B-buniek a ako xenotransplantačný model u imunokompromitovaných hostiteľov.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Prolymfocytová leukémia B-buniek
Miesto metastáz
Periférna krv (leukemická)
Aplikácie
Výskum prolymfocytovej leukémie B-buniek; biológia leukémie zrelých B-buniek; rezistencia na liečbu pri mutácii génu TP53; hodnotenie inhibítorov BTK; citlivosť na venetoklax; testovanie protilátok namierených proti CD20; skríning liekov na liečbu leukémie B-buniek
Synonymá
  • JVM3

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
lymfoblastoidné bunky rastúce jednotlivo alebo v zhlukoch v suspenzii;
Typ bunky
B lymfoblast
Doba zdvojnásobenia
~30 hodín

04Identifikátory

Citácia
JVM-3 (katalógové číslo Cytion 305266)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: p.Pro1435Leu, heterozygotná; Mutácia: p.Lys601Asn, heterozygotná

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS
Disociačné činidlo
Nie je potrebné (suspenzná kultúra)
Rozmnožovanie kultúr
Každé 2–3 dni zrieďte kultúru na koncentráciu 2–5 × 10⁵ buniek/ml čerstvým, vopred zohriatym kompletným médiom. Pred pasážovaním spočítajte životaschopné bunky. V prípade potreby je možné na výmenu média použiť centrifugáciu (300×g, 5 min).
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
3 až 5 × 10⁵ buniek/ml
Obnova kvapaliny
Každé 2 až 3 dni
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
73 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský