Vai al contenuto
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia prolinfocitica a cellule B
Sito metastatico
Sangue periferico (leucemico)
Sinonimi
JVM3

Documenti

JVM-3

Cell line · Codice prodotto 305266

€0.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La JVM-3 è una linea cellulare derivata da una leucemia prolinfocitica a cellule B (B-PLL) umana, ottenuta dal sangue periferico di un paziente maschio caucasico di 73 anni. La linea cresce in sospensione sotto forma di cellule linfoblastoidi, sia singolarmente che in aggregati sparsi, ed è un modello ampiamente utilizzato per la B-PLL, una leucemia a cellule B mature rara e aggressiva. La JVM-3 presenta mutazioni del gene TP53 (p.Pro1435Leu eterozigote e p.Lys601Asn eterozigote), che inattivano la funzione di soppressione tumorale della proteina p53 e sono associate alla resistenza alla chemioterapia nelle neoplasie a cellule B. La linea viene coltivata in RPMI 1640 al 90% + FBS al 10% inattivato termicamente.

La linea JVM-3 è applicabile nella ricerca sulla B-PLL, compresi gli studi sulla biologia della leucemia a cellule B mature, la resistenza ai farmaci associata alle mutazioni del gene TP53, l’analisi della via di segnalazione del BCR, la valutazione delle terapie mirate (inibitori di BTK, venetoclax, anticorpi anti-CD20) e lo screening farmacologico per le neoplasie a cellule B. Viene inoltre utilizzata negli studi comparativi sui sottotipi di leucemia a cellule B e come modello di xenotrapianto in soggetti immunocompromessi.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia prolinfocitica a cellule B
Sito metastatico
Sangue periferico (leucemico)
Applicazioni
Ricerca sulla leucemia prolinfocitica a cellule B; biologia della leucemia a cellule B mature; resistenza ai farmaci nelle forme con mutazione del gene TP53; valutazione degli inibitori della BTK; sensibilità al venetoclax; test con anticorpi mirati al CD20; screening farmacologico per la leucemia a cellule B
Sinonimi
  • JVM3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
cellule linfoblastoidi che crescono singolarmente o in gruppi in sospensione;
Tipo di cellula
Linfoblasto B
Tempo di raddoppio
~30 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
JVM-3 (codice catalogo Cytion 305266)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: p.Pro1435Leu, eterozigote; Mutazione: p.Lys601Asn, eterozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Reagente di dissociazione
Non richiesto (coltura in sospensione)
Subcoltura
Ogni 2–3 giorni, diluire la coltura a 2–5 × 10⁵ cellule/ml con terreno completo fresco e preriscaldato. Contare le cellule vitali prima del ripasso. Se necessario, è possibile ricorrere alla centrifugazione (300×g, 5 min) per sostituire il terreno.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
da 3 a 5 × 10⁵ cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
Ogni 2 o 3 giorni
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
73 anni
Etnia
Caucasico