Siirry sisältöön
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
B-solujen prolymfosyyttinen leukemia
Metastaasikohde
Perifeerinen veri (leukeminen)
Synonyymit
JVM3

Asiakirjat

JVM-3

Cell line · Tuotenumero 305266

€0.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

JVM-3 on ihmisen B-solujen prolymfosyyttinen leukemia (B-PLL) -solulinja, joka on peräisin 73-vuotiaan valkoihoisen miespotilaan ääreisverestä. Linja kasvaa suspensioissa lymfoblastoidisina soluina joko yksittäin tai löysinä ryppäinä, ja se on laajalti käytetty malli B-PLL:lle, joka on harvinainen ja aggressiivinen kypsien B-solujen leukemia. JVM-3:ssa on TP53-mutaatioita (p.Pro1435Leu-heterotsygootti ja p.Lys601Asn-heterotsygootti), jotka inaktivoivat p53:n tuumorisuppressoritoiminnan ja liittyvät kemoterapian resistenssiin B-solupahanlaatuisuuksissa. Solulinjaa viljellään 90 % RPMI 1640 -kasvatusliuoksessa, johon on lisätty 10 % lämpöinaktivoitua FBS:ää.

JVM-3 soveltuu B-PLL-tutkimukseen, mukaan lukien kypsien B-soluleukemian biologian tutkimukset, TP53-mutaatioihin liittyvän lääkeresistenssin tutkimukset, BCR-signalointireitin analysointi, kohdennettujen hoitojen arviointi (BTK-estäjät, venetoklaksi, CD20:ta kohdentavat vasta-aineet) sekä B-solupahanlaatuisten kasvainten farmakologisessa lääkeaineiden seulonnassa. Sitä käytetään myös B-soluleukemian alatyyppien vertailututkimuksissa sekä ksenotransplantaattimallina immuunipuutteisilla isännillä.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
B-solujen prolymfosyyttinen leukemia
Metastaasikohde
Perifeerinen veri (leukeminen)
Sovellukset
B-solujen prolymfosyyttisen leukemian tutkimus; kypsien B-solujen leukemian biologia; TP53-mutaatioon liittyvä lääkeresistenssi; BTK-estäjän arviointi; venetoklaksiin kohdistuva herkkyys; CD20:ta kohdentavien vasta-aineiden testaus; B-soluleukemian lääkeaineiden seulonta
Synonyymit
  • JVM3

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
suspensiossa yksittäin tai ryppäinä kasvavat lymfoblastoidisolut;
Solutyyppi
B-lymfoblasti
Kaksinkertaistumisaika
~30 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
JVM-3 (Cytionin tuotenumero 305266)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: p.Pro1435Leu, heterotsygootti; Mutaatio: p.Lys601Asn, heterotsygootti

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Ei vaadita (suspensiokulttuuri)
Soluviljely
Laimenna viljelmä 2–5 × 10⁵ solua/ml:ksi tuoreella, esilämmitetyllä täysravinteisella elatusaineella 2–3 päivän välein. Laske elävien solujen määrä ennen siirtoa. Elatusaineen vaihtamiseen voidaan tarvittaessa käyttää sentrifugointia (300×g, 5 min).
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
3–5 × 10⁵ solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
73 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen