Přejít na obsah
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Prolymfocytární leukémie B-buněk
Místo metastázy
Periferní krev (leukemická)
Synonyma
JVM3

Dokumenty

JVM-3

Cell line · Číslo výrobku 305266

€0.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

JVM-3 je buněčná linie lidské prolymfocytární leukémie B-buněk (B-PLL), která byla izolována z periferní krve 73letého pacienta kavkazského původu. Tato buněčná linie roste v suspenzi jako lymfoblastoidní buňky, a to buď jednotlivě, nebo ve volných shlucích, a je široce používaným modelem pro B-PLL, což je vzácná a agresivní leukémie zralých B-buněk. JVM-3 nese mutace v genu TP53 (heterozygotní p.Pro1435Leu a heterozygotní p.Lys601Asn), které inaktivují funkci p53 jako tumorového supresoru a jsou spojeny s rezistencí vůči chemoterapii u malignit B-buněk. Linie se kultivuje v médiu 90 % RPMI 1640 + 10 % tepelně inaktivovaného FBS.

JVM-3 je vhodná pro výzkum B-PLL, včetně studií biologie zralobuněčné B-buněčné leukémie, rezistence na léky spojené s mutacemi TP53, analýzy signální dráhy BCR, hodnocení cílených terapií (inhibitory BTK, venetoklax, protilátky namířené proti CD20) a farmakologického screeningu léčiv pro malignity B-buněk. Používá se také ve srovnávacích studiích podtypů B-buněčné leukémie a jako model xenotransplantátu u imunokompromitovaných hostitelů.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Prolymfocytární leukémie B-buněk
Místo metastázy
Periferní krev (leukemická)
Aplikace
Výzkum prolymfocytární leukémie z B-buněk; biologie leukémie z zralých B-buněk; rezistence na léčiva u mutací genu TP53; hodnocení inhibitorů BTK; citlivost na venetoklax; testování protilátek namířených proti CD20; screening léčiv pro leukémii z B-buněk
Synonyma
  • JVM3

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
lymfoblastoidní buňky rostoucí jednotlivě nebo ve shlucích v suspenzi;
Typ buňky
B lymfoblast
Doba zdvojnásobení
~30 hodin

04Identifikátory

Citace
JVM-3 (katalogové číslo Cytion 305266)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: p.Pro1435Leu, heterozygotní; Mutace: p.Lys601Asn, heterozygotní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Disociační činidlo
Není nutné (suspenzní kultura)
Subkultivace
Každé 2–3 dny zřeďte kulturu na koncentraci 2–5 × 10⁵ buněk/ml čerstvým, předem ohřátým kompletním médiem. Před pasážováním spočítejte životaschopné buňky. V případě potřeby lze k výměně média použít odstředění (300×g, 5 min).
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
3 až 5 × 10⁵ buněk/ml
Obnova tekutin
Každé 2 až 3 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
73 let
Etnická příslušnost
Kavkazský