Pereiti prie turinio
HCC44
Audinys
Plaučiai
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Dokumentai

HCC44

Cell line · Prekės numeris 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HCC44 ląstelių linija yra nedidelio ląstelių plaučių vėžio (NSCLC) modelis, žinomas dėl jame esančios KRAS mutacijos, kuri atlieka svarbų vaidmenį vėžio progresavime ir atsparume gydymui. Tyrime, kuriame buvo tiriamos KRAS sukeltos NSCLC savybės, nustatyta, kad HCC44 gyvybingumas priklauso nuo obuolių fermento 1 (ME1), o tai rodo, kad KRAS mutacija šioje ląstelių linijoje sustiprina genų, dalyvaujančių glutamino metabolizme ir redokso pusiausvyroje, ekspresiją. ME1 vaidmuo NADPH gamybai padeda kovoti su oksidaciniu stresu, kuris yra ypač svarbus greitai besidauginančioms KRAS mutaciją turinčioms vėžio ląstelėms.

Tolesni tyrimai su natūraliais junginiais, tokiais kaip chromomicino analogai, parodė potencialią terapinę reikšmę HCC44 atžvilgiu. Chromomicinas SA2 ir susijusios molekulės buvo įvertintos dėl jų citotoksinio poveikio HCC44, parodant sumažėjusį stiprumą, palyginti su kitais analogais, dėl šoninių grandinių modifikacijų, kurios veikia jų sąveiką su DNR. Be to, buvo tiriamas ląstelių linijos atsakas į spindulinę terapiją, o tai rodo, kad sutrikdžius glutamino metabolizmą, HCC44 gali tapti jautresnės spinduliams, o tai galėtų padėti įveikti kai kuriuos KRAS mutacijų sukeliamus spindulinio atsparumo aspektus.

Audinys
Plaučiai
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
HCC44 (Cytion katalogo numeris 305456)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigotinė; Mutacija: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutacija: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozigotinė; Mutacija: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
54 metai
Etninė priklausomybė
Europos