الانتقال إلى المحتوى
HCC44
الأنسجة
الرئة
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

المستندات

HCC44

Cell line · رقم المنتج 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا HCC44 هي نموذج لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة (NSCLC) معروف باحتوائه على طفرة KRAS، التي تلعب دورًا مهمًا في تطور السرطان ومقاومته للعلاج. في دراسة استكشافية لخصائص سرطان الرئة غير الصغير الخلايا المدفوع بـ KRAS، تم تحديد أن HCC44 يعتمد على إنزيم الماليك 1 (ME1) من أجل البقاء، مما يشير إلى أن طفرة KRAS في هذا الخط الخلوي تعزز التعبير الجيني للجينات المشاركة في استقلاب الجلوتامين وتوازن الأكسدة والاختزال. يساعد دور ME1 في توليد NADPH في مواجهة الإجهاد التأكسدي، وهو أمر حيوي بشكل خاص للخلايا السرطانية الحاملة لطفرة KRAS التي تمر بمرحلة تكاثر سريع.

أظهرت أبحاث إضافية حول المركبات الطبيعية مثل نظائر الكروموميسين أهمية علاجية محتملة لـ HCC44. تم تقييم الكروموميسين SA2 والجزيئات ذات الصلة من حيث تأثيراتها السامة للخلايا على HCC44، حيث أظهرت فعالية أقل مقارنة بالنظائر الأخرى بسبب التعديلات في السلاسل الجانبية التي تؤثر على تفاعلها مع الحمض النووي. بالإضافة إلى ذلك، تمت دراسة استجابة خط الخلايا للعلاج الإشعاعي، مما يشير إلى أن اضطراب استقلاب الجلوتامين قد يجعل HCC44 أكثر حساسية للإشعاع، مما قد يتغلب على بعض جوانب مقاومة الإشعاع الناتجة عن طفرات KRAS.

الأنسجة
الرئة
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
HCC44 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305456)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2060

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: KRAS، p.Gly12Cys (c.34G>T)، متماثلة؛ الطفرة: TERT، c.1-124C>A (c.228C>A)؛ طفرة: TP53، p.Ser94Ter (c.281C>G)، متماثلة؛ طفرة: TP53، p.Arg175Leu (c.524G>T)، متماثلة

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
54 سنة
الأصل العرقي
أوروبي