Gå direkte til indholdet
HCC44
Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Dokumenter

HCC44

Cell line · Varenummer 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HCC44-cellelinjen er en model for ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), der er kendt for at bære en KRAS-mutation, som spiller en væsentlig rolle i kræftens udvikling og resistens over for behandling. I en undersøgelse, der undersøgte karakteristikaene ved KRAS-drevet NSCLC, blev HCC44 identificeret som afhængig af malic enzyme 1 (ME1) for levedygtighed, hvilket tyder på, at KRAS-mutationen i denne cellelinje forstærker ekspressionen af gener involveret i glutaminmetabolisme og redoxbalance. ME1's rolle i generering af NADPH hjælper med at modvirke oxidativt stress, hvilket er særligt vigtigt for KRAS-mutante kræftceller, der gennemgår hurtig proliferation.

Yderligere forskning i naturlige forbindelser som chromomycinanaloger har vist potentiel terapeutisk relevans for HCC44. Chromomycin SA2 og beslægtede molekyler blev evalueret for deres cytotoksiske virkninger på HCC44 og viste reduceret styrke sammenlignet med andre analoger på grund af ændringer i sidekæder, der påvirker deres interaktion med DNA. Derudover er cellelinjens respons på strålebehandling blevet undersøgt, hvilket indikerer, at forstyrrelse af glutaminmetabolismen kan gøre HCC44 følsom over for stråling, hvilket potentielt kan overvinde visse aspekter af stråleresistens forårsaget af KRAS-mutationer.

Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCC44 (Cytion-katalognummer 305456)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutation: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozygot; Mutation: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
54 år
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk