
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Adenokarzinom
- Synonyme
- HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44
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HCC44
Cell line · Artikelnummer 305456
The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...
Anpassung / Empfehlungen
- HCC44Cell line€430.00
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Die Zelllinie HCC44 ist ein Modell für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC), das dafür bekannt ist, eine KRAS-Mutation zu tragen, welche eine bedeutende Rolle bei der Krebsprogression und der Therapieresistenz spielt. In einer Studie zur Untersuchung der Eigenschaften von KRAS-getriebenem NSCLC wurde festgestellt, dass HCC44 für seine Lebensfähigkeit auf das Malatenzym 1 (ME1) angewiesen ist, was darauf hindeutet, dass die KRAS-Mutation in dieser Zelllinie die Expression von Genen verstärkt, die am Glutaminstoffwechsel und am Redoxgleichgewicht beteiligt sind. Die Rolle von ME1 bei der Bildung von NADPH trägt zur Bekämpfung von oxidativem Stress bei, was für KRAS-mutierte Krebszellen, die sich in schneller Proliferation befinden, besonders wichtig ist.
Weitere Forschungen zu Naturstoffen wie Chromomycin-Analoga haben eine potenzielle therapeutische Relevanz für HCC44 aufgezeigt. Chromomycin SA2 und verwandte Moleküle wurden hinsichtlich ihrer zytotoxischen Wirkung auf HCC44 untersucht und zeigten im Vergleich zu anderen Analoga eine geringere Wirksamkeit aufgrund von Modifikationen in den Seitenketten, die ihre Wechselwirkung mit der DNA beeinflussen. Zudem wurde die Reaktion der Zelllinie auf Strahlentherapie untersucht, was darauf hindeutet, dass eine Störung des Glutaminstoffwechsels HCC44 gegenüber Strahlung sensibilisieren könnte, wodurch möglicherweise einige Aspekte der durch KRAS-Mutationen bedingten Strahlenresistenz überwunden werden könnten.
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Adenokarzinom
- Synonyme
- HCC-44
- HCC0044
- Hamon Cancer Center 44
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HCC44 (Cytion-Katalognummer 305456)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2060
05Expression und Anfälligkeit
- Mutationsprofil
- Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutation: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozygot; Mutation: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozygot
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Aussaatdichte
- 1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 54 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Europäisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja