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HCC44
Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

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HCC44

Cell line · Artikelnummer 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie HCC44 ist ein Modell für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC), das dafür bekannt ist, eine KRAS-Mutation zu tragen, welche eine bedeutende Rolle bei der Krebsprogression und der Therapieresistenz spielt. In einer Studie zur Untersuchung der Eigenschaften von KRAS-getriebenem NSCLC wurde festgestellt, dass HCC44 für seine Lebensfähigkeit auf das Malatenzym 1 (ME1) angewiesen ist, was darauf hindeutet, dass die KRAS-Mutation in dieser Zelllinie die Expression von Genen verstärkt, die am Glutaminstoffwechsel und am Redoxgleichgewicht beteiligt sind. Die Rolle von ME1 bei der Bildung von NADPH trägt zur Bekämpfung von oxidativem Stress bei, was für KRAS-mutierte Krebszellen, die sich in schneller Proliferation befinden, besonders wichtig ist.

Weitere Forschungen zu Naturstoffen wie Chromomycin-Analoga haben eine potenzielle therapeutische Relevanz für HCC44 aufgezeigt. Chromomycin SA2 und verwandte Moleküle wurden hinsichtlich ihrer zytotoxischen Wirkung auf HCC44 untersucht und zeigten im Vergleich zu anderen Analoga eine geringere Wirksamkeit aufgrund von Modifikationen in den Seitenketten, die ihre Wechselwirkung mit der DNA beeinflussen. Zudem wurde die Reaktion der Zelllinie auf Strahlentherapie untersucht, was darauf hindeutet, dass eine Störung des Glutaminstoffwechsels HCC44 gegenüber Strahlung sensibilisieren könnte, wodurch möglicherweise einige Aspekte der durch KRAS-Mutationen bedingten Strahlenresistenz überwunden werden könnten.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
HCC44 (Cytion-Katalognummer 305456)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutation: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozygot; Mutation: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
54 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch