Přejít na obsah
HCC44
Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Dokumenty

HCC44

Cell line · Číslo výrobku 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HCC44 je model nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC), který je známý tím, že nese mutaci genu KRAS, jenž hraje významnou roli v progresi nádoru a rezistenci na léčbu. Ve studii zkoumající charakteristiky NSCLC způsobeného mutací KRAS bylo zjištěno, že životaschopnost buněk HCC44 závisí na enzymu ME1 (malic enzyme 1), což naznačuje, že mutace KRAS v této buněčné linii zvyšuje expresi genů podílejících se na metabolismu glutaminu a redoxní rovnováze. Úloha enzymu ME1 při tvorbě NADPH pomáhá potlačovat oxidační stres, což je obzvláště důležité pro rakovinné buňky s mutací KRAS, které procházejí rychlou proliferací.

Další výzkum přírodních sloučenin, jako jsou analogy chromomycinu, ukázal potenciální terapeutický význam pro HCC44. Chromomycin SA2 a příbuzné molekuly byly hodnoceny z hlediska jejich cytotoxických účinků na HCC44 a vykazovaly sníženou účinnost ve srovnání s jinými analogy kvůli modifikacím v postranních řetězcích, které ovlivňují jejich interakci s DNA. Dále byla studována reakce buněčné linie na radiační terapii, což naznačuje, že narušení metabolismu glutaminu by mohlo zvýšit citlivost HCC44 na záření, což by potenciálně mohlo překonat některé aspekty radioresistence způsobené mutacemi KRAS.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
HCC44 (katalogové číslo Cytion 305456)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygotní; Mutace: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutace: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozygotní; Mutace: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozygotní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
54 let
Etnická příslušnost
Evropská