Μετάβαση στο περιεχόμενο
HCC44
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Έγγραφα

HCC44

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά HCC44 είναι ένα μοντέλο μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) γνωστό για την παρουσία μιας μετάλλαξης στο γονίδιο KRAS, η οποία διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη του καρκίνου και στην ανθεκτικότητα στη θεραπεία. Σε μια μελέτη που διερεύνησε τα χαρακτηριστικά του NSCLC που προκαλείται από το KRAS, διαπιστώθηκε ότι η HCC44 εξαρτάται από το ένζυμο 1 της μηλικής οξέος (ME1) για τη βιωσιμότητά της, γεγονός που υποδηλώνει ότι η μετάλλαξη KRAS σε αυτή τη κυτταρική σειρά ενισχύει την έκφραση γονιδίων που εμπλέκονται στο μεταβολισμό της γλουταμίνης και στην οξειδοαναγωγική ισορροπία. Ο ρόλος του ME1 στη δημιουργία NADPH βοηθά στην αντιμετώπιση του οξειδωτικού στρες, το οποίο είναι ιδιαίτερα ζωτικής σημασίας για τα καρκινικά κύτταρα με μετάλλαξη KRAS που υφίστανται ταχεία πολλαπλασιασμό.

Περαιτέρω έρευνα σε φυσικές ενώσεις όπως τα ανάλογα της χρωμομυκίνης έχει δείξει πιθανή θεραπευτική σημασία για το HCC44. Η χρωμομυκίνη SA2 και συναφείς μοριακές ενώσεις αξιολογήθηκαν ως προς τις κυτταροτοξικές τους επιδράσεις στο HCC44, παρουσιάζοντας μειωμένη δραστικότητα σε σύγκριση με άλλα ανάλογα λόγω τροποποιήσεων στις πλευρικές αλυσίδες που επηρεάζουν την αλληλεπίδρασή τους με το DNA. Επιπλέον, έχει μελετηθεί η απόκριση της κυτταρικής σειράς στην ακτινοθεραπεία, υποδεικνύοντας ότι η διαταραχή του μεταβολισμού της γλουταμίνης θα μπορούσε να ευαισθητοποιήσει το HCC44 στην ακτινοβολία, ξεπερνώντας ενδεχομένως ορισμένες πτυχές της ακτινοανθεκτικότητας που προσδίδουν οι μεταλλάξεις του KRAS.

Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HCC44 (αριθμός καταλόγου Cytion 305456)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_2060

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μεταλλαγή: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), ομόζυγη· Μεταλλαγή: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A)· Μεταλλαγή: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), ομόζυγη; Μεταλλαγή: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), ομόζυγη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
54 χρόνια
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό