Gå til innholdet
HCC44
Vev
Lunge
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Dokumenter

HCC44

Cell line · Produktnummer 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HCC44-cellelinjen er en modell for ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) som er kjent for å bære en KRAS-mutasjon, som spiller en viktig rolle i kreftprogresjon og behandlingsresistens. I en studie som undersøkte egenskapene til KRAS-drevet NSCLC, ble HCC44 identifisert som avhengig av malic enzyme 1 (ME1) for levedyktighet, noe som tyder på at KRAS-mutasjonen i denne cellelinjen forsterker uttrykket av gener involvert i glutaminmetabolisme og redoksbalanse. ME1s rolle i generering av NADPH bidrar til å motvirke oksidativt stress, noe som er særlig viktig for KRAS-muterte kreftceller som gjennomgår rask proliferasjon.

Videre forskning på naturlige forbindelser som kromomycinanaloger har vist potensiell terapeutisk relevans for HCC44. Kromomycin SA2 og relaterte molekyler ble evaluert for deres cytotoksiske effekter på HCC44, og viste redusert potens sammenlignet med andre analoger på grunn av modifikasjoner i sidekjedene som påvirker deres interaksjon med DNA. I tillegg er cellelinjens respons på strålebehandling blitt studert, noe som indikerer at forstyrrelse av glutaminmetabolismen kan gjøre HCC44 mer følsom for stråling, og potensielt overvinne enkelte aspekter av stråleresistensen som KRAS-mutasjonene medfører.

Vev
Lunge
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCC44 (Cytion-katalognummer 305456)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutasjon: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutasjon: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozygot; Mutasjon: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
54 år
Etnisitet
Europeisk