
- Tissue
- Pulmão
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44
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HCC44
Cell line · Product number 305456
The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...
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01General information
- Description
A linhagem celular HCC44 é um modelo de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) conhecido por apresentar uma mutação no gene KRAS, que desempenha um papel significativo na progressão do câncer e na resistência ao tratamento. Em um estudo que explorou as características do NSCLC induzido por KRAS, verificou-se que a HCC44 depende da enzima málica 1 (ME1) para sua viabilidade, sugerindo que a mutação no KRAS nessa linha celular aumenta a expressão de genes envolvidos no metabolismo da glutamina e no equilíbrio redox. O papel da ME1 na geração de NADPH auxilia no combate ao estresse oxidativo, o que é particularmente vital para células cancerosas com mutação no KRAS que passam por rápida proliferação.
Pesquisas adicionais sobre compostos naturais, como os análogos da cromomicina, demonstraram potencial relevância terapêutica para a HCC44. A cromomicina SA2 e moléculas relacionadas foram avaliadas quanto aos seus efeitos citotóxicos na HCC44, apresentando potência reduzida em comparação com outros análogos devido a modificações nas cadeias laterais que afetam sua interação com o DNA. Além disso, a resposta da linhagem celular à radioterapia foi estudada, indicando que a perturbação do metabolismo da glutamina poderia sensibilizar o HCC44 à radiação, potencialmente superando alguns aspectos da radiorresistência conferida pelas mutações no KRAS.
- Tissue
- Pulmão
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- HCC-44
- HCC0044
- Hamon Cancer Center 44
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
04Identifiers
- Citation
- HCC44 (número de catálogo da Cytion 305456)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2060
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutação: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigótica; Mutação: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutação: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozigótica; Mutação: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozigótica
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 54 anos
- Ethnicity
- Europeu
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes