
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44
Asiakirjat
HCC44
Cell line · Tuotenumero 305456
The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...
Räätälöinti / Suositukset
- HCC44Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HCC44-solulinja on ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) -malli, joka tunnetaan KRAS-mutaatioistaan, joilla on merkittävä rooli syövän etenemisessä ja hoidon vastustuskyvyssä. Tutkimuksessa, jossa selvitettiin KRAS-välitteisen NSCLC:n ominaisuuksia, havaittiin, että HCC44:n elinkelpoisuus riippuu maliini-entsyymistä 1 (ME1), mikä viittaa siihen, että tämän solulinjan KRAS-mutaatio tehostaa glutamiinimetaboliaan ja redox-tasapainoon liittyvien geenien ilmentymistä. ME1:n rooli NADPH:n tuottamisessa auttaa torjumaan oksidatiivista stressiä, mikä on erityisen tärkeää nopeasti lisääntyville KRAS-mutanttisille syöpäsoluille.
Lisätutkimukset kromomysiinin analogien kaltaisista luonnollisista yhdisteistä ovat osoittaneet potentiaalisen terapeuttisen merkityksen HCC44:n hoidossa. Kromomysiini SA2:n ja siihen liittyvien molekyylien sytotoksisia vaikutuksia HCC44:ään arvioitiin, ja niiden teho osoittautui heikommaksi verrattuna muihin analogeihin sivuketjujen modifikaatioiden vuoksi, jotka vaikuttavat niiden vuorovaikutukseen DNA:n kanssa. Lisäksi on tutkittu solulinjan vastetta sädehoitoon, ja tulokset viittaavat siihen, että glutamiinimetabolian häiritseminen voisi herkistää HCC44:n säteilylle, mikä voisi mahdollisesti kumota joitakin KRAS-mutaatioiden aiheuttamia säteilynkestävyyden piirteitä.
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- HCC-44
- HCC0044
- Hamon Cancer Center 44
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HCC44 (Cytion-tuotenumero 305456)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2060
05Ilmentyminen ja alttius
- Mutaatioprofiili
- Mutaatio: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homotsygoottinen; Mutaatio: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutaatio: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homotsygoottinen; Mutaatio: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homotsygoottinen
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1–3 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 54 vuotta
- Etnisyys
- Eurooppalainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä