Siirry sisältöön
HCC44
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Asiakirjat

HCC44

Cell line · Tuotenumero 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HCC44-solulinja on ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) -malli, joka tunnetaan KRAS-mutaatioistaan, joilla on merkittävä rooli syövän etenemisessä ja hoidon vastustuskyvyssä. Tutkimuksessa, jossa selvitettiin KRAS-välitteisen NSCLC:n ominaisuuksia, havaittiin, että HCC44:n elinkelpoisuus riippuu maliini-entsyymistä 1 (ME1), mikä viittaa siihen, että tämän solulinjan KRAS-mutaatio tehostaa glutamiinimetaboliaan ja redox-tasapainoon liittyvien geenien ilmentymistä. ME1:n rooli NADPH:n tuottamisessa auttaa torjumaan oksidatiivista stressiä, mikä on erityisen tärkeää nopeasti lisääntyville KRAS-mutanttisille syöpäsoluille.

Lisätutkimukset kromomysiinin analogien kaltaisista luonnollisista yhdisteistä ovat osoittaneet potentiaalisen terapeuttisen merkityksen HCC44:n hoidossa. Kromomysiini SA2:n ja siihen liittyvien molekyylien sytotoksisia vaikutuksia HCC44:ään arvioitiin, ja niiden teho osoittautui heikommaksi verrattuna muihin analogeihin sivuketjujen modifikaatioiden vuoksi, jotka vaikuttavat niiden vuorovaikutukseen DNA:n kanssa. Lisäksi on tutkittu solulinjan vastetta sädehoitoon, ja tulokset viittaavat siihen, että glutamiinimetabolian häiritseminen voisi herkistää HCC44:n säteilylle, mikä voisi mahdollisesti kumota joitakin KRAS-mutaatioiden aiheuttamia säteilynkestävyyden piirteitä.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
HCC44 (Cytion-tuotenumero 305456)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homotsygoottinen; Mutaatio: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutaatio: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homotsygoottinen; Mutaatio: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
54 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen