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HCC44
Tissue
Pulmón
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

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HCC44

Cell line · Product number 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular HCC44 es un modelo de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) conocido por presentar una mutación en el gen KRAS, la cual desempeña un papel significativo en la progresión del cáncer y la resistencia al tratamiento. En un estudio que exploró las características del NSCLC impulsado por KRAS, se identificó que la línea celular HCC44 depende de la enzima malica 1 (ME1) para su viabilidad, lo que sugiere que la mutación de KRAS en esta línea celular potencia la expresión de genes involucrados en el metabolismo de la glutamina y el equilibrio redox. El papel de la ME1 en la generación de NADPH ayuda a contrarrestar el estrés oxidativo, lo cual es particularmente vital para las células cancerosas con mutación en KRAS que experimentan una rápida proliferación.

Investigaciones adicionales sobre compuestos naturales como los análogos de la cromomicina han demostrado una posible relevancia terapéutica para la línea celular HCC44. Se evaluaron la cromomicina SA2 y moléculas relacionadas en cuanto a sus efectos citotóxicos sobre la línea celular HCC44, lo que mostró una potencia reducida en comparación con otros análogos debido a modificaciones en las cadenas laterales que afectan su interacción con el ADN. Además, se ha estudiado la respuesta de la línea celular a la radioterapia, lo que indica que alterar el metabolismo de la glutamina podría sensibilizar al HCC44 a la radiación, superando potencialmente algunos aspectos de la radioresistencia conferida por las mutaciones de KRAS.

Tissue
Pulmón
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial

04Identifiers

Citation
HCC44 (número de catálogo de Cytion 305456)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Mutación: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homocigótica; Mutación: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutación: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homocigótica; Mutación: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homocigótica

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Seeding density
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
54 años
Ethnicity
Europeo