İçeriğe atla
HCC44
Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

HCC44

Cell line · Ürün numarası 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HCC44 hücre hattı, kanserin ilerlemesinde ve tedaviye dirençte önemli bir rol oynayan KRAS mutasyonunu barındırmasıyla bilinen bir küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC) modelidir. KRAS kaynaklı NSCLC'nin özelliklerini araştıran bir çalışmada, HCC44'ün canlılığı için malik enzim 1'e (ME1) bağımlı olduğu tespit edilmiştir; bu da, bu hücre hattındaki KRAS mutasyonunun glutamin metabolizması ve redoks dengesinde rol oynayan genlerin ekspresyonunu artırdığını düşündürmektedir. NADPH üretiminde ME1'in rolü, oksidatif strese karşı koymaya yardımcı olur; bu da, hızlı çoğalma sürecinde olan KRAS mutasyonlu kanser hücreleri için özellikle hayati önem taşır.

Kromomisin analogları gibi doğal bileşikler üzerine yapılan daha ileri araştırmalar, HCC44 ile potansiyel terapötik bir ilişki olduğunu göstermiştir. Kromomisin SA2 ve ilgili moleküller, HCC44 üzerindeki sitotoksik etkileri açısından değerlendirilmiş ve DNA ile etkileşimlerini etkileyen yan zincirlerdeki değişiklikler nedeniyle diğer analoglara kıyasla daha düşük etki göstermiştir. Ek olarak, hücre hattının radyasyon tedavisine verdiği yanıt incelenmiş ve glutamin metabolizmasının bozulmasının HCC44'ü radyasyona duyarlı hale getirebileceği, böylece KRAS mutasyonlarının sağladığı radyorezistansın bazı yönlerinin potansiyel olarak aşılabileceği belirtilmiştir.

Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HCC44 (Cytion katalog numarası 305456)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigot; Mutasyon: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutasyon: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozigot; Mutasyon: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
54 yıl
Etnik köken
Avrupa