Tartalomra ugrás
HCC44
Szövet
Tüdő
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Dokumentumok

HCC44

Cell line · Termékszám 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HCC44 sejtvonal egy nem kissejtes tüdőrák (NSCLC) modell, amelyről ismert, hogy KRAS-mutációt hordoz, amely jelentős szerepet játszik a rák progressziójában és a kezeléssel szembeni rezisztenciában. A KRAS-vezérelt NSCLC jellemzőit vizsgáló tanulmányban megállapították, hogy a HCC44 életképessége a malát-enzim 1-től (ME1) függ, ami arra utal, hogy a KRAS-mutáció ebben a sejtvonalban fokozza a glutamin-anyagcserében és a redox-egyensúlyban részt vevő gének expresszióját. Az ME1 szerepe a NADPH termelésében segít az oxidatív stressz ellensúlyozásában, ami különösen fontos a gyorsan szaporodó KRAS-mutáns ráksejtek számára.

A kromomicin-analógokhoz hasonló természetes vegyületek további kutatása kimutatta a HCC44-re gyakorolt potenciális terápiás jelentőségüket. A kromomicin SA2-t és a kapcsolódó molekulákat a HCC44-re gyakorolt citotoxikus hatásaik szempontjából értékelték, és kiderült, hogy a DNS-sel való kölcsönhatásukat befolyásoló oldallánc-módosulások miatt hatékonyságuk alacsonyabb, mint más analógoké. Ezenkívül tanulmányozták a sejtvonal sugárterápiára adott válaszát, ami arra utal, hogy a glutamin-anyagcsere zavarása érzékenyebbé teheti a HCC44-et a sugárzásra, potenciálisan leküzdve a KRAS-mutációk által okozott sugárrezisztencia bizonyos aspektusait.

Szövet
Tüdő
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
HCC44 (Cytion katalógusszám: 305456)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
Mutáció: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigóta; Mutáció: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutáció: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozigóta; Mutáció: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozigóta

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
54 év
Etnikai hovatartozás
Európai