Skip to content
HCC44
Tissue
ปอด
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Documents

HCC44

Cell line · Product number 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ HCC44 เป็นแบบจำลองมะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก (NSCLC) ที่รู้จักกันดีว่ามีการกลายพันธุ์ของยีน KRAS ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการลุกลามของมะเร็งและการดื้อต่อการรักษา ในการศึกษาที่สำรวจลักษณะของ NSCLC ที่ขับเคลื่อนโดย KRAS พบว่า HCC44 ขึ้นอยู่กับเอนไซม์มาลิก 1 (ME1) สำหรับการมีชีวิตอยู่ ซึ่งบ่งชี้ว่าการกลายพันธุ์ของ KRAS ในสายเซลล์นี้เพิ่มการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญกลูตามีนและการสมดุลรีดอกซ์ บทบาทของ ME1 ในการสร้าง NADPH ช่วยในการต่อต้านความเครียดออกซิเดชัน ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อเซลล์มะเร็งที่มีการกลายพันธุ์ของ KRAS ที่กำลังแบ่งตัวอย่างรวดเร็ว

การวิจัยเพิ่มเติมเกี่ยวกับสารประกอบธรรมชาติ เช่น อนุพันธ์ของโครโมไมซิน ได้แสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องในการรักษาที่อาจเกิดขึ้นกับ HCC44 อนุพันธ์ของโครโมไมซิน SA2 และโมเลกุลที่เกี่ยวข้องได้รับการประเมินผลในการทำลายเซลล์ของ HCC44 ซึ่งแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่ลดลงเมื่อเทียบกับอนุพันธ์อื่น ๆ เนื่องจากการปรับเปลี่ยนในสายข้างที่มีผลต่อการโต้ตอบกับ DNA นอกจากนี้ การตอบสนองของเซลล์ไลน์ต่อการรักษาด้วยรังสีได้รับการศึกษาแล้ว ซึ่งบ่งชี้ว่าการรบกวนเมแทบอลิซึมของกลูตามีนอาจทำให้ HCC44 ไวต่อรังสีมากขึ้น ซึ่งอาจเอาชนะบางแง่มุมของการดื้อต่อรังสีที่เกิดจากการกลายพันธุ์ของ KRAS ได้

Tissue
ปอด
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
HCC44 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305456)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), ชนิดโฮโมไซโกต; การกลายพันธุ์: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); การกลายพันธุ์: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), ชนิดโฮโมไซโกต; การกลายพันธุ์: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), ชนิดโฮโมไซโกต

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
54 ปี
Ethnicity
ยุโรป