Skip to content
HCC44
Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Documents

HCC44

Cell line · Product number 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים HCC44 הוא מודל לסרטן ריאות תאים לא קטנים (NSCLC) הידוע בכך שהוא נושא מוטציה ב-KRAS, הממלאת תפקיד משמעותי בהתקדמות הסרטן ובעמידות לטיפול. במחקר שבחן את המאפיינים של NSCLC המונע על ידי KRAS, זוהתה HCC44 כתלויה באנזים מאלית 1 (ME1) לצורך הישרדותה, מה שמרמז כי המוטציה ב-KRAS בקו תאים זה מגבירה את הביטוי של גנים המעורבים במטבוליזם של גלוטמין ובאיזון החמצון-חיזור. תפקידו של ME1 בייצור NADPH מסייע בהתמודדות עם לחץ חמצוני, דבר החיוני במיוחד לתאי סרטן בעלי מוטציה ב-KRAS העוברים התרבות מהירה.

מחקרים נוספים על תרכובות טבעיות כמו אנלוגים של כרומומיצין הראו רלוונטיות טיפולית פוטנציאלית ל-HCC44. כרומומיצין SA2 ומולקולות קשורות נבדקו על השפעותיהם הציטוטוקסיות על HCC44, והראו עוצמה מופחתת בהשוואה לאנלוגים אחרים עקב שינויים בשרשראות הצדדיות המשפיעים על האינטראקציה שלהם עם ה-DNA. בנוסף, נחקרה תגובת קו התאים לטיפול בהקרנות, מה שמצביע על כך שהפרעה במטבוליזם של הגלוטמין עשויה להגביר את רגישותו של HCC44 לקרינה, ובכך להתגבר על היבטים מסוימים של עמידות לקרינה הנובעת ממוטציות ב-KRAS.

Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
HCC44 (מספר קטלוג Cytion 305456)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), הומוזיגוטית; מוטציה: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); מוטציה: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), הומוזיגוטית; מוטציה: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), הומוזיגוטית

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
54 שנים
Ethnicity
אירופאי