Mine otse sisu juurde
HCC44
Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Dokumendid

HCC44

Cell line · Toote number 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC44 rakuliin on mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) mudel, mis on tuntud KRAS-mutatsiooni kandjana; sellel mutatsioonil on oluline roll vähi progresseerumisel ja ravimresistentsuse tekkimisel. Uuringus, milles uuriti KRAS-i poolt põhjustatud NSCLC omadusi, tuvastati, et HCC44 eluvõime sõltub õunhappe ensüümist 1 (ME1), mis viitab sellele, et KRAS-mutatsioon selles rakuliinis suurendab glutamiini ainevahetuses ja redoksitasakaalus osalevate geenide ekspressiooni. ME1 roll NADPH-i tootmisel aitab võidelda oksüdatiivse stressiga, mis on eriti oluline kiiresti paljunevate KRAS-mutatsiooniga vähirakkude jaoks.

Edasised uuringud looduslike ühendite, nagu kromomütsiini analoogide kohta on näidanud potentsiaalset terapeutilist tähtsust HCC44 suhtes. Kromomütsiini SA2 ja sellega seotud molekulide tsütotoksilist mõju HCC44-le hinnati, näidates teiste analoogidega võrreldes vähenenud toimet, mis tuleneb külgahelate modifikatsioonidest, mis mõjutavad nende interaktsiooni DNA-ga. Lisaks on uuritud rakuliini reaktsiooni kiiritusravile, mis näitab, et glutamiini ainevahetuse häirimine võib muuta HCC44 kiirgusele tundlikumaks, ületades potentsiaalselt mõned KRAS-mutatsioonidest tingitud kiirgusresistentsuse aspektid.

Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
HCC44 (Cytioni katalooginumber 305456)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homosügootne; Mutatsioon: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutatsioon: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homosügootne; Mutatsioon: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
54 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa