Ga naar de inhoud
HCC44
Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
HCC-44, HCC0044, Hamon Cancer Center 44

Documenten

HCC44

Cell line · Productnummer 305456

The HCC44 cell line is a non-small cell lung cancer (NSCLC) model known for harboring a KRAS mutation, which plays a significant role in cancer progressio...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HCC44-cellijn is een model voor niet-kleincellige longkanker (NSCLC) dat bekendstaat om de aanwezigheid van een KRAS-mutatie, die een belangrijke rol speelt bij de progressie van kanker en resistentie tegen behandeling. In een studie naar de kenmerken van KRAS-gedreven NSCLC werd vastgesteld dat HCC44 voor zijn levensvatbaarheid afhankelijk is van malic enzyme 1 (ME1), wat suggereert dat de KRAS-mutatie in deze cellijn de expressie versterkt van genen die betrokken zijn bij het glutaminemetabolisme en de redoxbalans. De rol van ME1 bij het genereren van NADPH helpt bij het tegengaan van oxidatieve stress, wat met name van vitaal belang is voor KRAS-mutante kankercellen die een snelle proliferatie doormaken.

Verder onderzoek naar natuurlijke verbindingen zoals chromomycine-analogen heeft potentiële therapeutische relevantie voor HCC44 aangetoond. Chromomycine SA2 en verwante moleculen werden geëvalueerd op hun cytotoxische effecten op HCC44, waarbij een verminderde werkzaamheid werd aangetoond in vergelijking met andere analogen als gevolg van modificaties in de zijketens die de interactie met DNA beïnvloeden. Daarnaast is de reactie van de cellijn op bestralingstherapie onderzocht, waaruit bleek dat verstoring van het glutaminemetabolisme HCC44 gevoeliger zou kunnen maken voor bestraling, waardoor mogelijk bepaalde aspecten van de door KRAS-mutaties veroorzaakte stralingsresistentie kunnen worden overwonnen.

Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • HCC-44
  • HCC0044
  • Hamon Cancer Center 44

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCC44 (Cytion-catalogusnummer 305456)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2060

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygoot; Mutatie: TERT, c.1-124C>A (c.228C>A); Mutatie: TP53, p.Ser94Ter (c.281C>G), homozygoot; Mutatie: TP53, p.Arg175Leu (c.524G>T), homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
54 jaar
Etnische afkomst
Europese