Pereiti prie turinio
KHOS-312H
Audinys
Kaulas
Liga
Osteosarkoma
Sinonimai
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Dokumentai

KHOS-312H

Cell line · Prekės numeris 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Mažos atsargos
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KHOS-312H yra žmogaus osteosarkomos ląstelių linija, gauta iš kaulų vėžio. Ši ląstelių linija priklauso KHOS išvestų osteosarkomų modelių grupei, kuriai, be kita ko, priklauso KHOSNP ir KHOS-240S. Kaip ir kitos osteosarkomos ląstelių linijos, KHOS-312H plačiai naudojama vėžio tyrimams, siekiant ištirti osteosarkomų biologiją, ypač jų genetines ir molekulines savybes, ir įvertinti galimus gydomuosius preparatus. KHOS-312H ląstelių linija pasižymi atsparumu tam tikriems tiksliniams kinazių inhibitoriams, pavyzdžiui, veikiantiems PI3K-Akt-mTOR kelią, todėl ji yra svarbus modelis osteosarkomos atsparumo vaistams mechanizmams tirti.

Viena iš svarbių KHOS-312H ląstelių linijos ypatybių - jos naudingumas atliekant didelės apimties vaistų nuo vėžio atranką. Atliekant plataus masto atrankinius tyrimus, KHOS-312H buvo išbandyta su daugeliu junginių, įskaitant FDA patvirtintus vaistus ir tiriamuosius preparatus. Šie tyrimai atskleidė, kad KHOS-312H pasižymi skirtingu jautrumu ir atsparumu skirtingoms priešvėžinių vaistų klasėms, o tai padeda mokslininkams sudaryti osteosarkomos atsako į gydymą molekulinį žemėlapį. Ypač išryškėjo šios ląstelių linijos atsparumas mTOR inhibitoriams, o tai rodo, kad šiam iššūkiui įveikti gali prireikti kombinuotosios terapijos arba naujų vaistų.

Audinys
Kaulas
Liga
Osteosarkoma
Sinonimai
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Tumorogeninis
Ne

04Identifikatoriai

Nuoroda
KHOS-312H (Cytion katalogo numeris 300447)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
13 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių