.jpg)
- Chusteczka
- Kość
- Choroba
- Mięsak kościopochodny
- Synonimy
- KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H
Dokumenty
KHOS-312H
Cell line · Numer produktu 300447
KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...
Dostosowanie / Zalecenia
- KHOS-312HCell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
KHOS-312H to ludzka linia komórek kostniakomięsaka pochodząca z raka kości. Ta linia komórkowa jest częścią grupy modeli kostniakomięsaka pochodzących od KHOS, która obejmuje między innymi KHOSNP i KHOS-240S. Podobnie jak inne linie komórkowe kostniakomięsaka, KHOS-312H jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem w celu zbadania biologii kostniakomięsaków, w szczególności ich cech genetycznych i molekularnych, oraz oceny potencjalnych środków terapeutycznych. Linia komórkowa KHOS-312H jest znana ze swojej oporności na niektóre ukierunkowane inhibitory kinaz, takie jak te wpływające na szlak PI3K-Akt-mTOR, co czyni ją niezbędnym modelem do badania mechanizmów oporności na leki w kostniakomięsaku.
Jedną z istotnych cech linii komórkowej KHOS-312H jest jej użyteczność w wysokoprzepustowych badaniach przesiewowych leków przeciwnowotworowych. W badaniach przesiewowych na dużą skalę, KHOS-312H został przetestowany przeciwko szerokiej gamie związków, w tym zarówno leków zatwierdzonych przez FDA, jak i badanych środków. Badania te ujawniły, że KHOS-312H wykazuje różny stopień wrażliwości i oporności na różne klasy leków przeciwnowotworowych, pomagając naukowcom w mapowaniu molekularnego krajobrazu odpowiedzi kostniakomięsaka na leczenie. W szczególności podkreślono oporność linii komórkowej na inhibitory mTOR, co sugeruje potencjalną potrzebę terapii skojarzonych lub nowych leków w celu przezwyciężenia tego wyzwania.
- Chusteczka
- Kość
- Choroba
- Mięsak kościopochodny
- Synonimy
- KHOS-321H
- KHOS312H
- KHOS321H
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do fibroblastów
- Nowotworotwórczy
- Nie
04Identyfikatory
- Źródło
- KHOS-312H (numer katalogowy Cytion 300447)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2545
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Wiek dawcy
- 13 lat
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak