Zum Inhalt springen
KHOS-312H
Gewebe
Knochen
Krankheit
Osteosarkom
Synonyme
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Dokumente

KHOS-312H

Cell line · Artikelnummer 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Niedriger Bestand
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

KHOS-312H ist eine menschliche Osteosarkom-Zelllinie, die von Knochenkrebs abstammt. Diese Zelllinie ist Teil einer Gruppe von KHOS-abgeleiteten Osteosarkom-Modellen, zu denen u. a. KHOSNP und KHOS-240S gehören. Wie andere Osteosarkom-Zelllinien wird KHOS-312H in der Krebsforschung intensiv genutzt, um die Biologie von Osteosarkomen, insbesondere ihre genetischen und molekularen Eigenschaften, zu untersuchen und potenzielle Therapeutika zu testen. Die Zelllinie KHOS-312H ist bekannt für ihre Resistenz gegen bestimmte zielgerichtete Kinase-Inhibitoren, wie z. B. solche, die den PI3K-Akt-mTOR-Signalweg beeinflussen, was sie zu einem wichtigen Modell für die Untersuchung von Arzneimittelresistenzmechanismen bei Osteosarkomen macht.

Eine der wichtigsten Eigenschaften der KHOS-312H-Zelllinie ist ihre Nützlichkeit für das Hochdurchsatz-Screening von Krebsmedikamenten. In groß angelegten Screening-Studien wurde KHOS-312H auf eine breite Palette von Wirkstoffen getestet, darunter sowohl von der FDA zugelassene Medikamente als auch Prüfpräparate. Diese Studien haben gezeigt, dass KHOS-312H unterschiedlich empfindlich und resistent gegenüber verschiedenen Klassen von Krebsmedikamenten ist, was den Forschern hilft, die molekulare Landschaft der Reaktion des Osteosarkoms auf die Behandlung zu kartieren. Besonders hervorgehoben wurde die Resistenz der Zelllinie gegen mTOR-Inhibitoren, was auf einen möglichen Bedarf an Kombinationstherapien oder neuartigen Wirkstoffen zur Bewältigung dieser Herausforderung hindeutet.

Gewebe
Knochen
Krankheit
Osteosarkom
Synonyme
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Tumorauslösend
Nein

04Bezeichner

Quellenangabe
KHOS-312H (Cytion Katalognummer 300447)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
13 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch