Mine otse sisu juurde
KHOS-312H
Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Dokumendid

KHOS-312H

Cell line · Toote number 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KHOS-312H on inimese osteosarkoomi rakuliin, mis on saadud luuvähist. See rakuliin on osa KHOS-st saadud osteosarkoomi mudelite rühmast, kuhu kuuluvad muu hulgas ka KHOSNP ja KHOS-240S. Nagu teisi osteosarkoomi rakuliine, kasutatakse ka KHOS-312H-d ulatuslikult vähiuuringutes osteosarkoomide bioloogia, eelkõige nende geneetiliste ja molekulaarsete omaduste uurimiseks ning võimalike raviainete hindamiseks. KHOS-312H rakuliin on tuntud oma resistentsuse poolest teatavate suunatud kinaasi inhibiitorite suhtes, näiteks nende suhtes, mis mõjutavad PI3K-Akt-mTOR rada, mistõttu on see oluline mudel osteosarkoomi ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks.

KHOS-312H rakuliini üks olulisi omadusi on selle kasulikkus vähivastaste ravimite kõrge läbilaskevõimega skriiningus. KHOS-312H on laiaulatuslikes sõeluuringutes testitud paljude ühendite, sealhulgas nii FDA poolt heaks kiidetud ravimite kui ka uuritavate ainete suhtes. Need uuringud on näidanud, et KHOS-312H on erineval määral tundlik ja resistentne erinevate vähivastaste ravimite klasside suhtes, aidates teadlastel kaardistada osteosarkoomi ravivastuse molekulaarset maastikku. Eriti on esile toodud rakuliini resistentsus mTOR-inhibiitorite suhtes, mis viitab potentsiaalsele vajadusele kombineeritud ravi või uute ainete järele, et sellest väljakutsest üle saada.

Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Tuumorigeenne
Ei

04Tunnused

Viide
KHOS-312H (Cytioni katalooginumber 300447)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
13 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia