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KHOS-312H
ティッシュ
骨
病気
骨肉腫
同義語
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

KHOS-312H

Cell line · 製品番号 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

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01概要

説明

KHOS-312Hは骨癌由来のヒト骨肉腫細胞株である。この細胞株は、KHOSNPやKHOS-240Sなどを含むKHOS由来の骨肉腫モデルグループの一部である。他の骨肉腫細胞株と同様に、KHOS-312Hは骨肉腫の生物学、特にその遺伝学的および分子学的特徴を研究し、潜在的な治療薬を評価するために癌研究に広く用いられている。KHOS-312H細胞株は、PI3K-Akt-mTOR経路に作用するような特定の標的キナーゼ阻害剤に対して抵抗性を示すことで知られており、骨肉腫における薬剤抵抗性メカニズムを研究する上で不可欠なモデルとなっている。

KHOS-312H細胞株の大きな特徴のひとつは、抗がん剤のハイスループットスクリーニングにおける有用性である。大規模スクリーニング研究において、KHOS-312HはFDA承認薬や治験薬を含む広範な化合物に対して試験されてきた。これらの研究により、KHOS-312Hは様々なクラスの抗癌剤に対して様々な感受性と耐性を示すことが明らかになり、研究者らは治療に対する骨肉腫の反応の分子的状況をマッピングするのに役立っている。特に、この細胞株のmTOR阻害剤に対する耐性が強調されており、この課題を克服するための併用療法や新規薬剤の必要性が示唆されている。

ティッシュ
骨
病気
骨肉腫
同義語
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
腫瘍形成性
いいえ

04識別子

引用
KHOS-312H(サイシオン カタログ番号 300447)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_2545

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
13年
民族
白人