Gå til innholdet
KHOS-312H
Vev
Bein
Sykdom
Osteosarkom
Synonymer
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Dokumenter

KHOS-312H

Cell line · Produktnummer 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

Lite på lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KHOS-312H er en human osteosarkomcellelinje avledet fra benkreft. Denne cellelinjen er en del av en gruppe KHOS-avledede osteosarkommodeller, som blant annet inkluderer KHOSNP og KHOS-240S. I likhet med andre osteosarkomcellelinjer brukes KHOS-312H i stor utstrekning i kreftforskning for å studere osteosarkomers biologi, særlig deres genetiske og molekylære egenskaper, og for å evaluere potensielle terapeutiske midler. KHOS-312H-cellelinjen er kjent for å være resistent mot visse målrettede kinasehemmere, for eksempel de som påvirker PI3K-Akt-mTOR-stien, noe som gjør den til en viktig modell for å studere resistensmekanismer i osteosarkom.

En av de viktigste egenskapene til KHOS-312H-cellelinjen er at den kan brukes til screening av kreftlegemidler med høy gjennomstrømming. I storskala screeningstudier har KHOS-312H blitt testet mot et bredt spekter av stoffer, inkludert både FDA-godkjente legemidler og legemidler under utprøving. Disse studiene har avdekket at KHOS-312H viser varierende grad av følsomhet og resistens mot ulike klasser av kreftlegemidler, noe som har hjulpet forskerne med å kartlegge det molekylære landskapet for osteosarkoms respons på behandling. Spesielt cellelinjens resistens mot mTOR-hemmere har blitt fremhevet, noe som tyder på et potensielt behov for kombinasjonsbehandlinger eller nye midler for å overvinne denne utfordringen.

Vev
Bein
Sykdom
Osteosarkom
Synonymer
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Tumorinduserende
Nei

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KHOS-312H (Cytion-katalognummer 300447)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
13 år
Etnisitet
Kaukasisk