Pāriet uz saturu
KHOS-312H
Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Dokumenti

KHOS-312H

Cell line · Preces numurs 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KHOS-312H ir cilvēka osteosarkomas šūnu līnija, kas iegūta no kaulu vēža. Šī šūnu līnija ir daļa no KHOS atvasinātu osteosarkomu modeļu grupas, kurā cita starpā ietilpst KHOSNP un KHOS-240S. Tāpat kā citas osteosarkomu šūnu līnijas, arī KHOS-312H tiek plaši izmantota vēža pētījumos, lai pētītu osteosarkomu bioloģiju, jo īpaši to ģenētiskās un molekulārās īpašības, un novērtētu potenciālos terapeitiskos līdzekļus. KHOS-312H šūnu līnija ir pazīstama ar savu rezistenci pret noteiktiem mērķtiecīgiem kināžu inhibitoriem, piemēram, tiem, kas ietekmē PI3K-Akt-mTOR ceļu, padarot to par būtisku modeli osteosarkomas rezistences pret zālēm mehānismu pētīšanai.

Viena no nozīmīgām KHOS-312H šūnu līnijas iezīmēm ir tās lietderība augstas izšķirtspējas pretvēža zāļu skrīningā. Plaša mēroga skrīninga pētījumos KHOS-312H ir pārbaudīta pret plašu savienojumu klāstu, tostarp gan FDA apstiprinātām zālēm, gan pētāmiem līdzekļiem. Šie pētījumi atklāja, ka KHOS-312H uzrāda dažādas jutības un rezistences pakāpes pret dažādām pretvēža zāļu grupām, palīdzot pētniekiem kartēt osteosarkomas reakcijas uz ārstēšanu molekulāro ainavu. Īpaši izcelta šūnu līnijas rezistence pret mTOR inhibitoriem, kas liecina par potenciālu nepieciešamību pēc kombinētas terapijas vai jauniem līdzekļiem, lai pārvarētu šo problēmu.

Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
KHOS-312H (Cytion kataloga numurs 300447)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
13 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis