İçeriğe atla
KHOS-312H
Doku
Kemik
Hastalık
Osteosarkom
Eş anlamlılar
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

KHOS-312H

Cell line · Ürün numarası 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KHOS-312H, kemik kanserinden türetilmiş bir insan osteosarkom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, diğerlerinin yanı sıra KHOSNP ve KHOS-240S'yi içeren bir grup KHOS türevi osteosarkom modelinin bir parçasıdır. Diğer osteosarkom hücre hatları gibi KHOS-312H de osteosarkomların biyolojisini, özellikle genetik ve moleküler özelliklerini incelemek ve potansiyel terapötik ajanları değerlendirmek için kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. KHOS-312H hücre hattı, PI3K-Akt-mTOR yolunu etkileyenler gibi belirli hedefli kinaz inhibitörlerine karşı direnciyle bilinir ve bu da onu osteosarkomda ilaç direnci mekanizmalarını incelemek için önemli bir model haline getirir.

KHOS-312H hücre hattının önemli özelliklerinden biri, antikanser ilaçları için yüksek verimli taramada kullanılmasıdır. Büyük ölçekli tarama çalışmalarında KHOS-312H, hem FDA onaylı ilaçlar hem de araştırma ajanları dahil olmak üzere çok çeşitli bileşiklere karşı test edilmiştir. Bu çalışmalar KHOS-312H'nin farklı antikanser ilaç sınıflarına karşı farklı derecelerde hassasiyet ve direnç gösterdiğini ortaya koyarak araştırmacıların osteosarkomun tedaviye verdiği yanıtın moleküler haritasını çıkarmalarına yardımcı oldu. Özellikle, hücre hattının mTOR inhibitörlerine karşı direnci özellikle vurgulanmıştır ve bu zorluğun üstesinden gelmek için kombinasyon tedavilerine veya yeni ajanlara potansiyel bir ihtiyaç olduğunu düşündürmektedir.

Doku
Kemik
Hastalık
Osteosarkom
Eş anlamlılar
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Tümör oluşturucu
Hayır

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KHOS-312H (Cytion katalog numarası 300447)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
13 yıl
Etnik köken
Kafkas