Siirry sisältöön
KHOS-312H
Kudos
Luu
Sairaus
Osteosarkooma
Synonyymit
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Asiakirjat

KHOS-312H

Cell line · Tuotenumero 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa vähän
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KHOS-312H on ihmisen osteosarkoomasolulinja, joka on peräisin luusyövästä. Tämä solulinja on osa KHOS-peräisten osteosarkoomamallien ryhmää, johon kuuluvat muun muassa KHOSNP ja KHOS-240S. Muiden osteosarkoomasolulinjojen tavoin KHOS-312H:ta käytetään laajasti syöpätutkimuksessa osteosarkoomien biologian, erityisesti niiden geneettisten ja molekulaaristen ominaisuuksien, tutkimiseen ja mahdollisten terapeuttisten aineiden arviointiin. KHOS-312H-solulinja on tunnettu resistenssistään tietyille kohdennetuille kinaasinestäjille, kuten PI3K-Akt-mTOR-reittiin vaikuttaville lääkkeille, mikä tekee siitä olennaisen tärkeän mallin osteosarkooman lääkeresistenssimekanismien tutkimiseen.

Yksi KHOS-312H-solulinjan merkittävistä piirteistä on sen käyttökelpoisuus syöpälääkkeiden korkean läpimenon seulonnassa. Laajamittaisissa seulontatutkimuksissa KHOS-312H:ta on testattu laajalla joukolla yhdisteitä, mukaan lukien FDA:n hyväksymät lääkkeet ja tutkittavat aineet. Nämä tutkimukset ovat paljastaneet, että KHOS-312H:n herkkyys ja resistenssi eri syöpälääkeryhmille vaihtelee, mikä auttaa tutkijoita kartoittamaan osteosarkooman hoitovasteen molekyylimaisemaa. Erityisesti on korostunut solulinjan resistenssi mTOR-inhibiittoreita kohtaan, mikä viittaa mahdolliseen yhdistelmähoitojen tai uusien aineiden tarpeeseen tämän haasteen voittamiseksi.

Kudos
Luu
Sairaus
Osteosarkooma
Synonyymit
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Kasvaimia aiheuttava
Ei

04Tunnisteet

Lähdeviite
KHOS-312H (Cytionin luettelonumero 300447)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
13 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen