Přejít na obsah
KHOS-312H
Tkáň
Kost
Nemoc
Osteosarkom
Synonyma
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Dokumenty

KHOS-312H

Cell line · Číslo výrobku 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Nízký stav zásob
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

KHOS-312H je lidská buněčná linie osteosarkomu odvozená od rakoviny kostí. Tato buněčná linie je součástí skupiny modelů osteosarkomů odvozených od KHOS, do které patří mimo jiné KHOSNP a KHOS-240S. Stejně jako ostatní buněčné linie osteosarkomů se KHOS-312H hojně využívá ve výzkumu rakoviny ke studiu biologie osteosarkomů, zejména jejich genetických a molekulárních charakteristik, a k hodnocení potenciálních terapeutických látek. Buněčná linie KHOS-312H je známá svou rezistencí vůči některým cíleným inhibitorům kináz, například těm, které ovlivňují dráhu PI3K-Akt-mTOR, což z ní činí základní model pro studium mechanismů rezistence vůči lékům u osteosarkomu.

Jednou z významných vlastností buněčné linie KHOS-312H je její využitelnost při vysokokapacitním screeningu protinádorových léčiv. V rozsáhlých screeningových studiích byla linie KHOS-312H testována proti široké škále sloučenin, včetně léků schválených FDA i zkoumaných látek. Tyto studie odhalily, že KHOS-312H vykazuje různé stupně citlivosti a rezistence vůči různým třídám protinádorových léčiv, což výzkumníkům pomáhá mapovat molekulární prostředí reakce osteosarkomu na léčbu. Zvláště byla zdůrazněna rezistence buněčné linie vůči inhibitorům mTOR, což naznačuje potenciální potřebu kombinované léčby nebo nových látek, které by tento problém překonaly.

Tkáň
Kost
Nemoc
Osteosarkom
Synonyma
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Tumorogenní
Ne

04Identifikátory

Citace
KHOS-312H (katalogové číslo Cytion 300447)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
13 let
Etnická příslušnost
Kavkazský