الانتقال إلى المحتوى
KHOS-312H
الأنسجة
العظام
المرض
الساركوما العظمية العظمية
المرادفات
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

المستندات

KHOS-312H

Cell line · رقم المنتج 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

مخزون منخفض
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

KHOS-312H هو سلالة خلايا الساركوما العظمية البشرية المشتقة من سرطان العظام. هذا الخط الخلوي هو جزء من مجموعة من نماذج الساركوما العظمية المستمدة من KHOS، والتي تشمل KHOSNP و KHOS-240S، من بين نماذج أخرى. ومثل خطوط خلايا الساركوما العظمية الأخرى، يُستخدم KHOS-312H على نطاق واسع في أبحاث السرطان لدراسة بيولوجيا الساركوما العظمية، وخاصة خصائصها الوراثية والجزيئية، وتقييم العوامل العلاجية المحتملة. يُعرف خط الخلايا KHOS-312H بمقاومته لبعض مثبطات الكيناز المستهدفة، مثل تلك التي تؤثر على مسار PI3K-Akt-mTOR، مما يجعله نموذجاً أساسياً لدراسة آليات مقاومة الأدوية في الساركوما العظمية.

تتمثل إحدى السمات المهمة لخط الخلايا KHOS-312H في فائدته في الفحص عالي الإنتاجية للأدوية المضادة للسرطان. في دراسات الفحص واسعة النطاق، تم اختبار KHOS-312H ضد مجموعة واسعة من المركبات، بما في ذلك الأدوية المعتمدة من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية والعوامل التجريبية. وقد كشفت هذه الدراسات أن KHOS-312H يُظهر درجات متفاوتة من الحساسية والمقاومة لفئات مختلفة من الأدوية المضادة للسرطان، مما يساعد الباحثين على رسم خريطة المشهد الجزيئي لاستجابة الساركوما العظمية للعلاج. وقد تم تسليط الضوء بشكل خاص على مقاومة خط الخلية لمثبطات mTOR، مما يشير إلى الحاجة المحتملة للعلاجات المركبة أو العوامل الجديدة للتغلب على هذا التحدي.

الأنسجة
العظام
المرض
الساركوما العظمية العظمية
المرادفات
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
لا يوجد

04المعرّفات

المرجع
KHOS-312H (كتالوج سيتيون رقم 300447)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2545

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
13 سنة
الأصل العرقي
قوقازي