Pereiti prie turinio
KMS-12-PE
Audinys
Pleuros išskyros
Liga
Daugybinė mieloma
Sinonimai
KMS 12 PE, KMS-12_PE, KMS-12PE, KMS12-PE, KMS12PE, Kawasaki Medical School-12-Pleural Effusion

Dokumentai

KMS-12-PE

Cell line · Prekės numeris 300286

The KMS-12-PE cell line, established from the pleural effusion of the same patient, differs significantly from KMS-12-BM in several aspects. KMS-12-PE cel...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KMS-12-PE ląstelių linija, sukurta iš to paties paciento pleuros išskyrų, nuo KMS-12-BM skiriasi keliais aspektais. KMS-12-PE ląstelės yra labiau diferencijuotos plazminių ląstelių stadijos, nes nėra CD20, tačiau CD38 ir PCA-1 raiška išlieka. Įspūdingas KMS-12-PE bruožas - gebėjimas ektopiškai gaminti ir išskirti seilių tipo amilazę tiek paciento pleuros išskyrose, tiek kultūroje, todėl ji yra unikali tarp žmogaus mielominių ląstelių linijų. Šis fenomenas susijęs su chromosomine delecija netoli srities, kurioje yra amilazės genas, konkrečiai del(1)(p22→pter), pastebėta didelėje dalyje KMS-12-PE ląstelių.

Nepaisant šių skirtingų skirtumų, tiek KMS-12-PE, tiek KMS-12-BM turi tą patį klono žymenį - translokaciją t(11;14)(q13;q32), kuri dažnai pasitaiko mielomos atvejais. Tačiau KMS-12-PE ląstelės turi mažiau chromosomų anomalijų nei KMS-12-BM ir yra hipodiploidinės. Kaip ir KMS-12-BM, KMS-12-PE negamina nei paviršinių, nei sekrecinių imunoglobulinų, nors ląstelės turi gerai išvystytą endoplazminį tinklą. Dėl abiejų ląstelių linijų navikiškumo nebuvimo, nepaisant jų agresyvaus augimo in vitro, ir stabilaus ilgalaikio dauginimosi terpėje be serumo, jos yra vertingos priemonės mielomos biologijai tirti, ypač kalbant apie mielomą, neprodukuojančią Ig.

Audinys
Pleuros išskyros
Liga
Daugybinė mieloma
Sinonimai
  • KMS 12 PE
  • KMS-12_PE
  • KMS-12PE
  • KMS12-PE
  • KMS12PE
  • Kawasaki Medical School-12-Pleural Effusion

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Ląstelių tipas
B ląstelė
Tumorogeninis
Nėra tumorigeniškas nuogoms pelėms

04Identifikatoriai

Nuoroda
KMS-12-PE (Cytion katalogo numeris 300286)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1333

05Išraiška ir jautrumas

Paviršiaus antigenai
CD3 -, CD4 -, CD13 -, CD14 -, CD15 -, CD19 -, CD20 -, CD34 -, CD38 +, CD138 +, HLA-DR +, PCA-1 +
Mutacijų profilis
Translokacija: t(11;14)(q13;q32)
Produktai
Nėra imunoglobulinų gamybos

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
Sėjos tankis
5 x 105 ląstelių/ml
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
64 metai
Etninė priklausomybė
Japonų