KMS-12-PE

La línea celular KMS-12-PE, establecida a partir del derrame pleural del mismo paciente, difiere significativamente de la KMS-12-BM en varios aspectos. Las células KMS-12-PE representan un estadio de células plasmáticas más diferenciadas terminalmente, como indica la ausencia de CD20 pero la expresión continua de CD38 y PCA-1. Una característica llamativa de KMS-12-PE es su capacidad para producir y secretar ectópicamente un tipo salival de amilasa, tanto en el derrame pleural del paciente como en cultivo, lo que la hace única entre las líneas celulares de mieloma humano. Este fenómeno está asociado a una deleción cromosómica cerca de la región donde se localiza el gen de la amilasa, concretamente del(1)(p22→pter), observada en una proporción significativa de células KMS-12-PE.

A pesar de estas diferencias, tanto KMS-12-PE como KMS-12-BM comparten el mismo marcador clonal, la translocación t(11;14)(q13;q32), que es común en los casos de mieloma. Sin embargo, las células KMS-12-PE muestran menos anomalías cromosómicas que las KMS-12-BM y tienden a ser hipodiploides. Al igual que KMS-12-BM, KMS-12-PE no produce inmunoglobulinas, ni en forma superficial ni secretora, aunque las células tienen un retículo endoplásmico bien desarrollado. La ausencia de tumorigenicidad en ambas líneas celulares, a pesar de su agresivo crecimiento in vitro, y su proliferación estable a largo plazo en medio libre de suero las convierten en valiosas herramientas para el estudio de la biología del mieloma, especialmente en el contexto del mieloma no productor de Ig.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía