KMS-12-PE

Garis sel KMS-12-PE, yang dibuat dari efusi pleura pasien yang sama, berbeda secara signifikan dari KMS-12-BM dalam beberapa aspek. Sel KMS-12-PE mewakili tahap sel plasma yang terdiferensiasi secara lebih akhir, seperti yang ditunjukkan oleh tidak adanya CD20 tetapi ekspresi CD38 dan PCA-1 yang terus berlanjut. Fitur yang mencolok dari KMS-12-PE adalah kemampuannya untuk secara ektopik memproduksi dan mengeluarkan jenis amilase saliva, baik dalam efusi pleura pasien maupun dalam kultur, menjadikannya unik di antara garis sel mieloma manusia. Fenomena ini dikaitkan dengan penghapusan kromosom di dekat wilayah di mana gen amilase berada, khususnya del (1) (p22 → pter), yang diamati pada sebagian besar sel KMS-12-PE.

Terlepas dari perbedaan yang jelas ini, baik KMS-12-PE dan KMS-12-BM memiliki penanda klonal yang sama, yaitu translokasi t (11;14) (q13;q32), yang umum terjadi pada kasus mieloma. Namun, sel KMS-12-PE menunjukkan lebih sedikit kelainan kromosom dibandingkan KMS-12-BM dan cenderung hipodiploid. Seperti KMS-12-BM, KMS-12-PE tidak menghasilkan imunoglobulin, baik dalam bentuk permukaan maupun sekretori, meskipun sel memiliki retikulum endoplasma yang berkembang dengan baik. Kurangnya tumorigenitas pada kedua garis sel, meskipun pertumbuhan in vitro yang agresif, dan proliferasi jangka panjang yang stabil dalam media bebas serum menjadikannya alat yang berharga untuk mempelajari biologi mieloma, terutama dalam konteks mieloma yang tidak memproduksi Ig.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami