KMS-12-PE

KMS-12-PE šūnu līnija, kas izveidota no tā paša pacienta pleiras izplūduma, būtiski atšķiras no KMS-12-BM vairākos aspektos. KMS-12-PE šūnas pārstāv vairāk termināli diferencētu plazmatisko šūnu stadiju, uz ko norāda CD20 neesamība, bet CD38 un PCA-1 nepārtraukta ekspresija. Pārsteidzoša KMS-12-PE iezīme ir tās spēja ektopiski ražot un izdalīt siekalu tipa amilāzi gan pacienta pleiras izplūdumā, gan kultūrā, padarot to unikālu starp cilvēka mielomas šūnu līnijām. Šis fenomens ir saistīts ar hromosomu deleciju amilazes gēna atrašanās vietas tuvumā, konkrēti del(1)(p22→pter), kas novērota ievērojamā daļā KMS-12-PE šūnu.

Neraugoties uz šīm atšķirībām, gan KMS-12-PE, gan KMS-12-BM ir viens un tas pats klona marķieris - translokācija t(11;14)(q13;q32), kas ir izplatīta mielomas gadījumos. Tomēr KMS-12-PE šūnām ir mazāk hromosomu anomāliju nekā KMS-12-BM, un tām ir tendence būt hipodiploīdām. Tāpat kā KMS-12-BM, arī KMS-12-PE neražo imūnglobulīnus ne virsmas, ne sekrēcijas formā, lai gan šūnām ir labi attīstīts endoplazmas tīkls. Abi šūnu līnijas nav tumorigēnas, neraugoties uz to agresīvo in vitro augšanu, un to stabilā ilgtermiņa proliferācija vidē, kas nesatur serumu, padara tās par vērtīgiem instrumentiem mielomas bioloģijas izpētei, jo īpaši saistībā ar mielomu, kas neražo imūndziedzerus.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu