Ga naar de inhoud
KMS-12-PE
Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Multipel myeloom
Synoniemen
KMS 12 PE, KMS-12_PE, KMS-12PE, KMS12-PE, KMS12PE, Kawasaki Medical School-12-Pleural Effusion

Documenten

KMS-12-PE

Cell line · Productnummer 300286

The KMS-12-PE cell line, established from the pleural effusion of the same patient, differs significantly from KMS-12-BM in several aspects. KMS-12-PE cel...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De KMS-12-PE cellijn, afkomstig uit de pleurale effusie van dezelfde patiënt, verschilt significant van KMS-12-BM in verschillende aspecten. KMS-12-PE cellen vertegenwoordigen een meer terminaal gedifferentieerd plasmacelstadium, zoals aangegeven door de afwezigheid van CD20 maar voortdurende expressie van CD38 en PCA-1. Een opvallend kenmerk van KMS-12-PE is het vermogen om ectopisch een speekselachtig type amylase te produceren en uit te scheiden, zowel in de pleurale effusie van de patiënt als in kweek, waardoor het uniek is onder de humane myeloomcellijnen. Dit fenomeen is geassocieerd met een chromosomale deletie in de buurt van de regio waar het amylase gen zich bevindt, specifiek del(1)(p22→pter), waargenomen in een significant deel van de KMS-12-PE cellen.

Ondanks deze verschillen delen zowel KMS-12-PE als KMS-12-BM dezelfde klonale marker, de translocatie t(11;14)(q13;q32), die veel voorkomt bij myeloom. KMS-12-PE cellen vertonen echter minder chromosomale afwijkingen dan KMS-12-BM en hebben de neiging om hypodiploïd te zijn. Net als KMS-12-BM produceert KMS-12-PE geen immunoglobulinen, noch in oppervlaktevorm, noch in secretoire vorm, hoewel de cellen een goed ontwikkeld endoplasmatisch reticulum hebben. Het gebrek aan tumorigeniciteit in beide cellijnen, ondanks hun agressieve in vitro groei, en hun stabiele lange-termijn proliferatie in serumvrij medium maken ze waardevolle hulpmiddelen voor het bestuderen van myeloom biologie, met name in de context van niet-immunoglobuline producerend myeloom.

Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Multipel myeloom
Synoniemen
  • KMS 12 PE
  • KMS-12_PE
  • KMS-12PE
  • KMS12-PE
  • KMS12PE
  • Kawasaki Medical School-12-Pleural Effusion

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Celtype
B cel
Tumorverwekkend
Niet tumorigeen in naakte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KMS-12-PE (Cytion catalogusnummer 300286)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1333

05Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
CD3 -, CD4 -, CD13 -, CD14 -, CD15 -, CD19 -, CD20 -, CD34 -, CD38 +, CD138 +, HLA-DR +, PCA-1 +
Mutatieprofiel
Translocatie: t(11;14)(q13;q32)
Producten
Geen immunoglobulineproductie

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Zaaidichtheid
5 x 105 cellen/ml
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
64 jaar
Etnische afkomst
Japans