Mine otse sisu juurde
KMS-12-PE
Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Müeloomi paljunemine
Sünonüümid
KMS 12 PE, KMS-12_PE, KMS-12PE, KMS12-PE, KMS12PE, Kawasaki Medical School-12-Pleural Effusion

Dokumendid

KMS-12-PE

Cell line · Toote number 300286

The KMS-12-PE cell line, established from the pleural effusion of the same patient, differs significantly from KMS-12-BM in several aspects. KMS-12-PE cel...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KMS-12-PE rakuliin, mis on loodud sama patsiendi pleuraefusioonist, erineb oluliselt KMS-12-BM-st mitme aspekti poolest. KMS-12-PE rakud esindavad lõplikult diferentseeritud plasmarakkude staadiumi, millele viitab CD20 puudumine, kuid CD38 ja PCA-1 jätkuv ekspressioon. KMS-12-PE silmatorkavaks tunnuseks on tema võime toota ja eritada ektoopiliselt süljetüüpi amülaasi nii patsiendi pleuraefusioonis kui ka kultuuris, mis teeb ta inimese müeloomi rakuliinide seas ainulaadseks. See nähtus on seotud kromosomaalse deletsiooniga piirkonnas, kus asub amülaasigeen, täpsemalt del(1)(p22→pter), mida täheldati märkimisväärsel osal KMS-12-PE rakkudest.

Vaatamata nendele erinevatele erinevustele on nii KMS-12-PE kui ka KMS-12-BM-l sama klooniline marker, translokatsioon t(11;14)(q13;q32), mis on müeloomi puhul tavaline. KMS-12-PE rakkudel on siiski vähem kromosoomianomaaliaid kui KMS-12-BM-l ja nad on pigem hüpodiploidsed. Nagu KMS-12-BM, ei tooda ka KMS-12-PE immunoglobuliine, ei pinnalisel ega sekretoorsel kujul, kuigi rakkudel on hästi arenenud endoplasmaatiline retikulum. Mõlema rakuliini vähene kasvavus, vaatamata nende agressiivsele in vitro kasvule, ja nende stabiilne pikaajaline proliferatsioon seerumivabas keskkonnas teevad neist väärtuslikud vahendid müeloomi bioloogia uurimiseks, eriti mitte-Ig-produktiivse müeloomi kontekstis.

Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Müeloomi paljunemine
Sünonüümid
  • KMS 12 PE
  • KMS-12_PE
  • KMS-12PE
  • KMS12-PE
  • KMS12PE
  • Kawasaki Medical School-12-Pleural Effusion

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
B-raku
Tuumorigeenne
Ei ole tuumorigeenne alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
KMS-12-PE (Cytioni katalooginumber 300286)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1333

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pinnaantigeenid
CD3 -, CD4 -, CD13 -, CD14 -, CD15 -, CD19 -, CD20 -, CD34 -, CD38 +, CD138 +, HLA-DR +, PCA-1 +
Mutatsiooniprofiil
Translokatsioon: t(11;14)(q13;q32)
Tooted
Immuunglobuliini tootmine puudub

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
5 x 105 rakku/ml
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
64 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani