KMS-12-PE

KMS-12-PE-cellelinjen, som ble etablert fra pleuraeffusjon fra samme pasient, skiller seg vesentlig fra KMS-12-BM på flere områder. KMS-12-PE-celler representerer et mer terminalt differensiert plasmacellestadium, noe som indikeres av fraværet av CD20, men fortsatt uttrykk av CD38 og PCA-1. Et slående trekk ved KMS-12-PE er dens evne til ektopisk å produsere og utskille en spyttlignende type amylase, både i pasientens pleuraeffusjon og i kultur, noe som gjør den unik blant humane myelomcellelinjer. Dette fenomenet er assosiert med en kromosomal delesjon i nærheten av regionen der amylasegenet er lokalisert, nærmere bestemt del(1)(p22→pter), som er observert i en betydelig andel av KMS-12-PE-cellene.

Til tross for disse forskjellene deler både KMS-12-PE og KMS-12-BM den samme klonale markøren, translokasjonen t(11;14)(q13;q32), som er vanlig i myelomtilfeller. KMS-12-PE-celler viser imidlertid færre kromosomavvik enn KMS-12-BM og har en tendens til å være hypodiploide. I likhet med KMS-12-BM produserer KMS-12-PE ikke immunglobuliner, verken i overflate- eller sekretorisk form, selv om cellene har et velutviklet endoplasmatisk retikulum. Mangelen på tumorigenisitet i begge cellelinjene, til tross for deres aggressive in vitro-vekst, og deres stabile langtidsproliferasjon i serumfritt medium gjør dem til verdifulle verktøy for studier av myelombiologi, spesielt i forbindelse med ikke-Ig-produserende myelom.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring