KMS-12-PE

Die Zelllinie KMS-12-PE, die aus dem Pleuraerguss desselben Patienten gewonnen wurde, unterscheidet sich in mehreren Aspekten deutlich von KMS-12-BM. KMS-12-PE-Zellen repräsentieren ein stärker differenziertes Plasmazellstadium, was durch das Fehlen von CD20, aber durch die anhaltende Expression von CD38 und PCA-1 angezeigt wird. Ein auffälliges Merkmal von KMS-12-PE ist seine Fähigkeit, ektopisch eine speichelartige Amylase zu produzieren und abzusondern, sowohl im Pleuraerguss des Patienten als auch in Kultur, was es unter den menschlichen Myelomzelllinien einzigartig macht. Dieses Phänomen steht im Zusammenhang mit einer chromosomalen Deletion in der Nähe der Region, in der sich das Amylase-Gen befindet, nämlich del(1)(p22→pter), die bei einem erheblichen Anteil der KMS-12-PE-Zellen beobachtet wurde.

Trotz dieser deutlichen Unterschiede weisen KMS-12-PE und KMS-12-BM denselben klonalen Marker auf, die Translokation t(11;14)(q13;q32), die bei Myelomfällen häufig vorkommt. KMS-12-PE-Zellen weisen jedoch weniger Chromosomenanomalien auf als KMS-12-BM und sind eher hypodiploid. Wie KMS-12-BM produziert auch KMS-12-PE keine Immunglobuline, weder in Oberflächen- noch in sekretorischer Form, obwohl die Zellen ein gut entwickeltes endoplasmatisches Retikulum aufweisen. Das Fehlen von Tumorigenität bei beiden Zelllinien trotz ihres aggressiven In-vitro-Wachstums und ihre stabile Langzeitvermehrung in serumfreiem Medium machen sie zu wertvollen Instrumenten für die Untersuchung der Myelombiologie, insbesondere im Zusammenhang mit dem nicht-Ig-produzierenden Myelom.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung