KMS-12-PE

A linha celular KMS-12-PE, estabelecida a partir do derrame pleural do mesmo doente, difere significativamente da KMS-12-BM em vários aspectos. As células KMS-12-PE representam um estádio de células plasmáticas mais terminalmente diferenciado, como indicado pela ausência de CD20, mas pela expressão contínua de CD38 e PCA-1. Uma caraterística marcante da KMS-12-PE é a sua capacidade de produzir e segregar ectopicamente um tipo de amilase salivar, tanto no derrame pleural do doente como em cultura, o que a torna única entre as linhas celulares de mieloma humano. Este fenómeno está associado a uma deleção cromossómica perto da região onde se localiza o gene da amilase, especificamente del(1)(p22→pter), observada numa proporção significativa de células KMS-12-PE.

Apesar destas diferenças distintas, tanto as KMS-12-PE como as KMS-12-BM partilham o mesmo marcador clonal, a translocação t(11;14)(q13;q32), que é comum nos casos de mieloma múltiplo. No entanto, as células KMS-12-PE apresentam menos anomalias cromossómicas do que as KMS-12-BM e tendem a ser hipodiplóides. Tal como as KMS-12-BM, as KMS-12-PE não produzem imunoglobulinas, nem na forma de superfície nem na forma secretora, apesar de as células terem um retículo endoplasmático bem desenvolvido. A ausência de tumorigenicidade em ambas as linhas celulares, apesar do seu crescimento agressivo in vitro, e a sua proliferação estável a longo prazo em meio sem soro tornam-nas ferramentas valiosas para o estudo da biologia do mieloma, particularmente no contexto do mieloma não produtor de Ig.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia