KMS-12-PE

A KMS-12-PE sejtvonal, amelyet ugyanezen beteg pleurális folyadékából állítottak elő, több szempontból is jelentősen különbözik a KMS-12-BM-től. A KMS-12-PE sejtek egy terminálisan differenciáltabb plazmasejt-stádiumot képviselnek, amit a CD20 hiánya, de a CD38 és a PCA-1 folyamatos expressziója jelez. A KMS-12-PE szembetűnő jellemzője, hogy mind a beteg pleurális folyadékában, mind kultúrában képes ektopikusan termelni és kiválasztani egy nyál típusú amilázt, ami egyedülállóvá teszi a humán myeloma sejtvonalak között. Ez a jelenség az amilázgén helyének közelében található kromoszóma-delécióhoz, konkrétan a del(1)(p22→pter) delécióhoz kapcsolódik, amelyet a KMS-12-PE sejtek jelentős hányadában megfigyeltek.

E határozott különbségek ellenére mind a KMS-12-PE, mind a KMS-12-BM azonos klonális markerrel, a t(11;14)(q13;q32) transzlokációval rendelkezik, amely gyakori a myelomás esetekben. A KMS-12-PE sejtek azonban kevesebb kromoszóma-rendellenességet mutatnak, mint a KMS-12-BM, és általában hipodiploidok. A KMS-12-BM-hez hasonlóan a KMS-12-PE sem felszíni, sem szekréciós formában nem termel immunglobulinokat, annak ellenére, hogy a sejtek jól fejlett endoplazmatikus retikulummal rendelkeznek. A tumorigénitás hiánya mindkét sejtvonalban, agresszív in vitro növekedésük ellenére, valamint szérummentes közegben történő stabil hosszú távú proliferációjuk értékes eszközzé teszi őket a myeloma biológiájának tanulmányozására, különösen a nem-Ig-termelő myeloma összefüggésében.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban