KMS-12-PE

Η κυτταρική σειρά KMS-12-PE, που δημιουργήθηκε από την υπεζωκοτική συλλογή του ίδιου ασθενούς, διαφέρει σημαντικά από την KMS-12-BM σε διάφορες πτυχές. Τα κύτταρα KMS-12-PE αντιπροσωπεύουν ένα πιο τελικώς διαφοροποιημένο στάδιο πλασματοκυττάρων, όπως υποδεικνύεται από την απουσία του CD20 αλλά τη συνεχιζόμενη έκφραση του CD38 και του PCA-1. Ένα εντυπωσιακό χαρακτηριστικό του KMS-12-PE είναι η ικανότητά του να παράγει και να εκκρίνει έκτοπα έναν σιελογενή τύπο αμυλάσης, τόσο στην πλευριτική συλλογή του ασθενούς όσο και σε καλλιέργεια, γεγονός που το καθιστά μοναδικό μεταξύ των ανθρώπινων κυτταρικών σειρών μυελώματος. Το φαινόμενο αυτό σχετίζεται με μια χρωμοσωμική διαγραφή κοντά στην περιοχή όπου βρίσκεται το γονίδιο της αμυλάσης, συγκεκριμένα del(1)(p22→pter), που παρατηρείται σε σημαντικό ποσοστό των κυττάρων KMS-12-PE.

Παρά τις διακριτές αυτές διαφορές, τόσο το KMS-12-PE όσο και το KMS-12-BM μοιράζονται τον ίδιο κλωνικό δείκτη, τη μετάθεση t(11;14)(q13;q32), η οποία είναι κοινή σε περιπτώσεις μυελώματος. Ωστόσο, τα κύτταρα KMS-12-PE εμφανίζουν λιγότερες χρωμοσωμικές ανωμαλίες από τα κύτταρα KMS-12-BM και τείνουν να είναι υποδιπλοειδή. Όπως και το KMS-12-BM, το KMS-12-PE δεν παράγει ανοσοσφαιρίνες, ούτε σε επιφανειακή ούτε σε εκκριτική μορφή, παρόλο που τα κύτταρα έχουν καλά ανεπτυγμένο ενδοπλασματικό δίκτυο. Η έλλειψη καρκινικότητας και στις δύο κυτταρικές σειρές, παρά την επιθετική in vitro ανάπτυξή τους, και ο σταθερός μακροχρόνιος πολλαπλασιασμός τους σε μέσο χωρίς ορό τις καθιστούν πολύτιμα εργαλεία για τη μελέτη της βιολογίας του μυελώματος, ιδίως στο πλαίσιο του μη Ig-παραγωγού μυελώματος.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης