Pereiti prie turinio
U-118 MG
Audinys
Smegenys
Liga
Astrocitoma
Metastazių vieta
Netaikoma (pirminis intrakranijinis navikas; nėra tolimų metastazių)
Sinonimai
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumentai

U-118 MG

Cell line · Prekės numeris 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Tai viena iš daugelio ląstelių linijų, kurias 1966-1969 m. iš piktybinių gliomų (taip pat žr. U-87 MG, U-138 MG ir U-373 MG) išvedė J. Pontenas su bendradarbiais.
Audinys
Smegenys
Liga
Astrocitoma
Metastazių vieta
Netaikoma (pirminis intrakranijinis navikas; nėra tolimų metastazių)
Paraiškos
Glioblastomos/astrocitomos tyrimai; glialinių navikų biologija; jautrumas spinduliuotei; chemoterapijos vertinimas (temozolomidas, CCNU); EGFR signalo perdavimo kelio analizė; NF-κB signalizacija; centrinės nervų sistemos navikų ikiklinikinis modeliavimas
Sinonimai
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Mišrus
Ląstelių tipas
Glijos ląstelės (astrocitai)
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis
Kariotipas
Šios linijos chromosomų skaičius yra beveik pentaploidinis, o chromosomų skaičiaus pasiskirstymas labai įvairus (40 % ląstelių chromosomų skaičius svyravo nuo 110 iki 115). Daugumoje metafazių rasta 14 žymenų: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 ir t(10q,22q), 6 iš jų rasta kai kuriose, o 10 - tik vienoje. Normalios 7, 8, 12, 19, 20 ir 22 chromosomos turėjo 5-6 kopijas kiekvienoje ląstelėje, x turėjo dvi kopijas, o Y chromosomos nebuvo.
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 36 iki 48 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
U-118 MG (Cytion katalogo numeris 300362)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
A kraujo grupė, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Izofermentai
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotipo dažnio produktas: 0.0001

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, ląsteles išsėkite į lėkšteles, išlaikydami tankį 5 × 10⁴ ląstelių/cm², ir prieš pirmąjį terpės keitimą palaukite mažiausiai 24 valandas, kol ląstelės prisitvirtins.
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 50 % bazinę terpę + 40 % FBS + 10 % DMSO arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
47 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių