Przejdź do treści
U-118 MG
Chusteczka
Mózg
Choroba
Gwiaździak
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (pierwotny guz śródczaszkowy; brak przerzutów odległych)
Synonimy
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumenty

U-118 MG

Cell line · Numer produktu 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
Jest to jedna z wielu linii komórkowych uzyskanych z glejaków złośliwych (patrz także U-87 MG, U-138 MG i U-373 MG) przez J. Pontena i współpracowników w latach 1966-1969.
Chusteczka
Mózg
Choroba
Gwiaździak
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (pierwotny guz śródczaszkowy; brak przerzutów odległych)
Zastosowania
Badania nad glejakiem wielopostaciowym/astrocytomem; biologia nowotworów glejowych; wrażliwość na promieniowanie; ocena chemioterapii (temozolomid, CCNU); analiza szlaku EGFR; sygnalizacja NF-κB; przedkliniczne modelowanie nowotworów OUN
Synonimy
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Mieszane
Typ komórki
Komórki glejowe (astrocytowe)
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy
Karyotyp
Linia ma prawie pentaploidalną liczbę chromosomów i szeroki zakres rozkładu liczby chromosomów (40% komórek miało liczbę od 110 do 115). Następujące 14 markerów znaleziono w większości metafaz: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 i t(10q,22q), 6 z nich znaleziono w niektórych, a 10 tylko w jednej. Normalne chromosomy 7, 8, 12, 19, 20 i 22 miały od 5 do 6 kopii na komórkę, x miał dwie kopie, a Y był nieobecny.
Czas podwojenia
ok. 36–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
U-118 MG (numer katalogowy Cytion 300362)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Grupa krwi A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Izoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, produkt częstotliwości fenotypu: 0.0001

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy wysiać komórki w gęstości 5 × 10⁴ komórek/cm² i odczekać co najmniej 24 godziny, aż komórki przylgną, przed pierwszą wymianą pożywki.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
47 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski