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U-118 MG
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Astrozytom
Metastasenherd
Nicht zutreffend (primärer intrakranieller Tumor; keine Fernmetastasen)
Synonyme
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

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U-118 MG

Cell line · Artikelnummer 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Dies ist eine von mehreren Zelllinien, die von J. Ponten und Mitarbeitern zwischen 1966 und 1969 aus bösartigen Gliomen gewonnen wurden (siehe auch U-87 MG, U-138 MG und U-373 MG).
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Astrozytom
Metastasenherd
Nicht zutreffend (primärer intrakranieller Tumor; keine Fernmetastasen)
Anwendungen
Forschung zu Glioblastomen/Astrozytomen; Biologie von Gliazelltumoren; Strahlenempfindlichkeit; Bewertung der Chemotherapie (Temozolomid, CCNU); Analyse des EGFR-Signalwegs; NF-κB-Signalweg; präklinische Modellierung von ZNS-Tumoren
Synonyme
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
Ohne Gentechnik
Angaben zum GVO-Status
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Gemischt
Zelltyp
Gliazellen (Astrozyten)
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen
Karyotyp
Die Linie hat eine nahezu pentaploide Chromosomenzahl und eine große Bandbreite der Chromosomenzahlverteilung (40 % der Zellen hatten Zahlen zwischen 110 und 115). Die folgenden 14 Marker wurden in den meisten Metaphasen gefunden: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 und t(10q,22q), 6 davon in einigen und 10 in nur einer. Die normalen Chromosomen 7, 8, 12, 19, 20 und 22 hatten 5 bis 6 Kopien pro Zelle, das X hatte zwei Kopien und das Y fehlte.
Verdopplungszeit
ca. 36 bis 48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
U-118 MG (Cytion Katalognummer 300362)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Blutgruppe A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Isoenzyme
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0001

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 × 10⁴ Zellen/cm² ausplattieren und vor dem ersten Mediumwechsel mindestens 24 Stunden für die Anhaftung einplanen.
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
47 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch