Mine otse sisu juurde
U-118 MG
Kude
Aju
Haigus
Astrotsütoom
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (primaarne intrakraniaalne kasvaja; kaugmetastaase puuduvad)
Sünonüümid
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumendid

U-118 MG

Cell line · Toote number 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
See on üks mitmest rakuliinist, mis on saadud J. Ponteni ja tema kaaslaste poolt aastatel 1966-1969 saadud pahaloomulistest glioomidest (vt ka U-87 MG, U-138 MG ja U-373 MG).
Kude
Aju
Haigus
Astrotsütoom
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (primaarne intrakraniaalne kasvaja; kaugmetastaase puuduvad)
Rakendused
Glioblastoomi/astrotsütoomi uurimine; gliaalsete kasvajate bioloogia; kiirgustundlikkus; kemoteraapia hindamine (temozolomiid, CCNU); EGFR-signaalitee analüüs; NF-κB-signaalimine; kesknärvisüsteemi kasvajate prekliiniline modelleerimine
Sünonüümid
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Segatud
Rakutüüp
Glia rakud (astrotsüüdid)
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
Liinil on peaaegu pentaploidne kromosoomide arv ja kromosoomide arvu jaotumine on väga erinev (40% rakkudest oli kromosoomide arvud vahemikus 110-115). Enamikus metafaasidest leiti järgmised 14 markerit: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 ja t(10q,22q), neist 6 leiti mõnes ja 10 ainult ühes. Normaalsetel kromosoomidel 7, 8, 12, 19, 20 ja 22 oli 5 kuni 6 koopiat raku kohta, x-l oli kaks koopiat ja Y puudus.
Kahekordistumisaeg
umbes 36–48 tundi

04Tunnused

Viide
U-118 MG (Cytioni katalooginumber 300362)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Veregrupp A, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Isoensüümid
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0001

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist külvake rakud tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² ja laske neil enne esimest kasvukeskkonna vahetust vähemalt 24 tundi kinnituda.
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
47 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia