Tartalomra ugrás
U-118 MG
Szövet
Agy
Betegség
Asztrocitóma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (elsődleges koponyán belüli daganat; nincs távoli áttét)
Szinonimák
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumentumok

U-118 MG

Cell line · Termékszám 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Ez egyike a J. Ponten és munkatársai által 1966 és 1969 között rosszindulatú gliomákból származó sejtvonalaknak (lásd még U-87 MG, U-138 MG és U-373 MG).
Szövet
Agy
Betegség
Asztrocitóma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (elsődleges koponyán belüli daganat; nincs távoli áttét)
Alkalmazások
Glioblastoma/asztrocitóma kutatás; glia-daganatok biológiája; sugárérzékenység; kemoterápia értékelése (temozolomid, CCNU); EGFR-útvonal elemzése; NF-κB jelátvitel; központi idegrendszeri daganatok preklinikai modellezése
Szinonimák
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Vegyes
Sejttípus
Glia sejtek (asztrociták)
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben
Kariotípus
A vonal közel pentaploid kromoszómaszámmal rendelkezik, és a kromoszómaszámok eloszlása széles skálán mozog (a sejtek 40%-ának kromoszómaszáma 110 és 115 között volt). A következő 14 markert találtuk a legtöbb metafázisban: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 és t(10q,22q), ezek közül 6 néhányban, 10 pedig csak egyben volt látható. A normális 7, 8, 12, 19, 20 és 22 kromoszómáknak sejtenként 5-6 másolata volt, az x-nek két másolata volt, az Y pedig hiányzott.
Kettőzési idő
kb. 36–48 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
U-118 MG (Cytion katalógusszám: 300362)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
A vércsoport, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Izoenzimek
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotípus gyakorisági termék: 0.0001

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után a sejteket 5 × 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel ültessük be a tenyésztőedénybe, és az első tápközeg-csere előtt legalább 24 órát várjunk, hogy a sejtek tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
47 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi