Pāriet uz saturu
U-118 MG
Audums
Smadzenes
Slimība
Astrocitoma
Metastāžu vieta
Neattiecas (primārs intrakraniāls audzējs; nav attālu metastāžu)
Sinonīmi
U-118 MG, U-118-MG, U118-MG, U118MG, U118, 118 MG, 118MG

Dokumenti

U-118 MG

Cell line · Preces numurs 300362

This is one of a number of cell lines derived from malignant gliomas (see also U-87 MG, U-138 MG and U-373 MG) by J. Ponten and associates from 1966 to 1969.

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts
Šī ir viena no vairākām šūnu līnijām, ko no ļaundabīgām gliomām (skatīt arī U-87 MG, U-138 MG un U-373 MG) 1966.-1969. gadā izveidoja J. Pontens un viņa līdzstrādnieki.
Audums
Smadzenes
Slimība
Astrocitoma
Metastāžu vieta
Neattiecas (primārs intrakraniāls audzējs; nav attālu metastāžu)
Pieteikumi
Glioblastomas/astrocitomas pētījumi; gliālo audzēju bioloģija; jutība pret staru terapiju; ķīmijterapijas novērtēšana (temozolomīds, CCNU); EGFR signālceļa analīze; NF-κB signālceļš; centrālās nervu sistēmas audzēju pirmsklīniskā modelēšana
Sinonīmi
  • U-118 MG
  • U-118-MG
  • U118-MG
  • U118MG
  • U118
  • 118 MG
  • 118MG

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype glioma cell line isolated by J. Ponten et al. (1966–1969)
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Jauktais
Šūnu tips
Gliālās šūnas (astrocīti)
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Kariotips
Šai līnijai ir gandrīz pentaploīds hromosomu skaits un plašs hromosomu skaita sadalījums (40 % šūnu hromosomu skaits bija no 110 līdz 115). Lielākajā daļā metafāžu tika konstatēti šādi 14 marķieri: t(1p,2p), t(3p,?), t(4p,11q), t(7p,22q), M6, t(9q,?), i(11q)18q t(10q,?), M14, M15, M16, M17 un t(10q,22q), 6 no tiem tika konstatēti dažās, bet 10 - tikai vienā. Normālās 7., 8., 12., 19., 20. un 22. hromosomās bija 5 līdz 6 kopijas katrā šūnā, x bija divas kopijas, bet Y nebija.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 36 līdz 48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
U-118 MG (Cytion kataloga numurs 300362)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0633

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
A asinsgrupa, Rh+, HLA Aw24, A28, B12, Bw47
Izoenzīmi
Me-2, 1, PGM3, 2, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0001

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izsējiet šūnas blīvumā 5 × 10⁴ šūnas/cm² un pirms pirmās barotnes nomaiņas ļaujiet tām vismaz 24 stundas pielipt.
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
47 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis